论文部分内容阅读
目的建立一种检测血管性假性血友病因子裂解酶(vWF-cp)活性的方法,并探讨其临床应用。方法用Sepharose CL-4B柱层析法从正常人新鲜冰冻血浆中分离出血管性假性血友病因子(vWF)作为酶反应底物。然后联合应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印记(western bloting)与发光绘图法(Luminographic Detection)(简称SWL法),分别检测60名健康成人、27名甲型血友病患者、28名脑梗塞患者、34名肝癌患者和7名TTP患者的vWF-cp活性,并比较各组的检测结果。结果该方法准确检测了60名健康成人和96名患者的血浆vWF-cp活性,敏感性为1.67%,批内和批间变异为4.81%和8.63%。60名健康成人血浆vWF-cp活性为(86.53±17.49)%;甲型血友病患者vWF-cp活性为(85.34±20.70)%,其活性与健康成人无显著性差异(p＞0.05);脑梗塞患者vWF-cp活性为(77.15±16.72)%,其活性低于健康成人(p＜0.05);肝癌患者vWF-cp活性为(67.88±12.96)%,其活性显著低于健康成人(p＜0.01);7例TTP患者,血浆置换前vWF-cp活性为(9.06±7.17)%,其活性显著低于健康成人(p＜0.01);血浆置换后24小时vWF-cp活性为(47.00±6.27)%,其活性有所升高,但仍低于健康成人(p＜0.01);恢复期vWF-cp活性为(83.18±8.83)%,其活性接近健康成人(p＞0.05)。结论1、使用Sepharose CL-4B柱层析法可从人新鲜冰冻血浆冷沉淀物中纯化出vWF多聚物,可作为酶反应底物。2、SWL法可准确检测健康成人和疾病患者的血浆vWF-cp活性,其敏感性、特异性和重复性较好,可应用于临床检验。3、甲型血友病患者vWF-cp活性与健康成人无明显差异;脑梗塞患者vWF-cp活性比健康成人降低;肝癌患者和TTP患者vWF-cp活性比健康成人显著降低;进行血浆置换能有效提高TTP患者的vWF-cp活性水平。