【摘 要】
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激肽释放酶是目前一种重要的临床用药,广泛应用于治疗心脑血管、男性不育、微循环障碍等疾病,受到医药工业的高度重视。用于临床的激肽释放酶药品主要是从猪胰脏中提取的,也
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激肽释放酶是目前一种重要的临床用药,广泛应用于治疗心脑血管、男性不育、微循环障碍等疾病,受到医药工业的高度重视。用于临床的激肽释放酶药品主要是从猪胰脏中提取的,也有少量为人尿激肽释放酶。从猪胰脏中提取激肽释放酶已经有几十年的历史,但是要寻找得率高、操作简便、操作周期短的分离方法还值得进一步的研究。研究表明,牛胰激肽释放酶也具有降血压,调节血液循环的作用。因此,牛胰激肽释放酶的纯化研究同样具有重要的经济价值以及应用价值。猪胰激肽释放酶的原料为新鲜胰脏,纯化工艺为:新鲜胰脏——丙酮粗提——硫酸铵盐析——层析。实验中分别用了凝胶过滤、疏水层析以及阴离子交换层析三种方法纯化猪胰激肽释放酶。最后根据纯化效果以及工业应用前景筛选出了一种经济实用的纯化介质—QAE-Sephadex阴离子介质,单独使用该介质可一步纯化出比活为342.5U/mg的激肽释放酶,比丙酮粗粉比活提高了34.52倍,活性回收率为60.8%。牛胰激肽释放酶的原料为盐析后产物,纯化工艺为:透析——层析。实验中分别用了凝胶过滤、疏水层析、阴离子交换层析以及阳离子交换层析四种方法纯化牛胰激肽释放酶。同样,根据纯化效果以及工业应用前景确定了一条较优的生产工艺——将CM-Sepharose CL-6B阳离子柱与Butyl-Sepharose 4FF疏水柱联用。两种介质联用后,可以得到比活为667.0U/mg的牛胰激肽释放酶,比粗粉比活提高了8.52倍,回收率为51.6%。
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