【摘 要】
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原位杂交技术是一种在细胞水平显示mRNA的分布及其变化的新兴技术,其基本原理是:在一定条件下,放射性同位素标记的寡聚核苷酸“探针”(其碱基序列与已知mRNA碱基序列中的某段相互补)可与细胞内的mRNA以碱基互补的原理特异性地结合而产生一杂交体。利用放射自显影技术,即可显示被标记的“探针”以及由其所显示的mRNA的分布状况。目前,原位杂交技术已被广泛地应用于神经科学的研究中,尤其是在神经受体的定位研
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原位杂交技术是一种在细胞水平显示mRNA的分布及其变化的新兴技术,其基本原理是:在一定条件下,放射性同位素标记的寡聚核苷酸“探针”(其碱基序列与已知mRNA碱基序列中的某段相互补)可与细胞内的mRNA以碱基互补的原理特异性地结合而产生一杂交体。利用放射自显影技术,即可显示被标记的“探针”以及由其所显示的mRNA的分布状况。目前,原位杂交技术已被广泛地应用于神经科学的研究中,尤其是在神经受体的定位研究方面,此技术已成为必不可少的手段。 GABA是脑内一种主要的抑制性神经递质,其抑制性作用是通过GABAA及GABAB受体介导的。GABA与GABAA受体的结合可使氯离子通道开启,而产生氯离子的内流,从而使突触后膜产生超极化而抑制突触后神经元的电活动。到目前为止,利用基因克隆技术,已发现了许多GABAA受体的亚单位及其变体,如α1,α2,α3,α4,α5及α6;β1,β2及β3;β1及β2;δ及ε。然而,对于各种亚单位在脑内的分布状况,却知之甚少。尤其是对于三个β亚单位(β1,β2和β3),到目前为止,尚未见有关其在脑内的详细分布的报道。因而,本实验利用原位杂交技术,观察了三种β亚单位(β1,β2及β3)的mRNA在大鼠脑内的分布状况。另外,有报道证实在神经发生过程中GABA具有营养因子性作用,而此作用也是由GABAA受体介导的。为了证明三种β亚单位是否与神经发生过程中GABA的营养因子性作用有关,本研究也同时观察了三种β亚单位mRNA在大鼠前脑及问脑内的生
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鼠源性单克隆抗体由于具有免疫原性不能在人体反复应用,而人源性单抗的制备还存在许多困难,如不太稳定,抗体产生水平低等,再者目前所制奋的人源性单抗多为IgM类,不太适合应用。利用基因工程技术可根据人们的需要制备各种类型的新型抗体。 抗体可变区基因的分离是研制基因工程抗体的关键步骤之一,体外扩增(PCR)是获得抗体可变区基因的一种最简便、最迅速的方法。在进行PCR之前,必须首先设计和合成引物,在被
转化生化因子α(TGFα)是一种小肽分子,正常细胞较少产生,而在许多肿瘤组织(肾癌,黑色素瘤等)却大量合成。TGFα与细胞表面的表皮生长因子受体(EGFR)结合,以自分泌方式参与肿瘤的形成和生长,具有重要的肿瘤诊断、预后及疗效评估意义。胶质瘤是临床常见的肿瘤之一,其死亡率极高。有关胶质瘤中TGFα状况的文献报道较少且互有出入。采用分子生物学方法研究胶质瘤中TGFα及相关基因的改变并予以纠正具有重要
进行性肌营养不良(Duchenne muscular dys-trophy DMD),是男性最常见的X连锁隐性致死性遗传病,发病率约为活产男婴的1/3,500,该病以进行性肌肉萎缩坏死为特征,直至机体衰竭死亡。目前尚无有效的延缓或阻止病程发展的治疗方法,因此,研究可靠的诊断与检测携带者方法具有重要的意义。 反向遗传学为DMD及其临床表现较温和的等位基因形式BMD的研究奠定了基础,从DMD/B
艾滋病(AIDS)是本世纪80年代初发现的一种烈性传染病,被称为“超级癌症”,5年病死率为100%,致病因子为人免疫缺陷病毒(HIV)。HIV在体内繁殖时,其mRNA先翻译出3种多聚蛋白质(均为结构蛋白质):Pr55gag,Pr160gag-pol和gP160,其中前两种多聚蛋白质在HIV基因编码的蛋白酶(Pr)的切割下,生成HIV成熟所必须的4种核心蛋白和4种酶。如果Pr的活力不足,就会造成HI
反思当下幼儿游戏的水平和意义,教师应当如何站在儿童的视角,支持幼儿高水平的游戏,以引发幼儿深度学习,我们认为首先需要把握"高水平游戏"和"深度学习"的关系,明确研究目标;其次确立以探究"支持幼儿高水平游戏策略"为主要目标,来推动深度研究;最后以"引发幼儿深度学习"为导向,梳理和运用策略。在幼儿游戏中,我们常深入地观察、反复地研读。面对当下幼儿的游戏,我们思考:幼儿进行的都是好游戏吗?
转基因动物是近些年才发展起来的生物高技术,经过科学家们近十年的辛勤努力,无论是在该技术的研究本身,还是在该技术的应用领域都已取得了令人瞩目的成就。迄今,利用该技术所取得的研究成果已充分展示了转基因动物技术在分子生物学、分子遗传学、分子免疫学、肿瘤工程学、医学及畜牧学等研究领域无限广阔的应用前景。因而,正吸引越来越多的优秀科学家投身于该领域研究的行列。 1982年,美国华盛顿大学医学院生物化学
人α肿瘤坏死因子(Human Tumor Necrosis Facfor hTNF)是由激活的巨噬细胞产生的一种多功能细胞因子,其最显著的活性特征是可以在体内或体外特异地杀伤多种肿瘤细胞,而对正常组织细胞则无明显的杀伤作用。此外,TNF还具有抗病毒感染、抑制病毒复制、激活巨噬细胞和多形核粒细胞,增强其细胞毒作用和吞噬功能,促进组织相容性抗原的表达、促分化诱导以及调节机体的免疫应答等多种重要的生物功
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