丙型肝炎病毒（HCV）是导致非胃肠道传播的肝炎的主要致病原.为单股正链RNA病毒,3.000多个氨基酸的前体蛋白切割后分为结构区与非结构区蛋白,HCV的非结构蛋白在病毒的复制及成熟中发挥重要的作用.如NS3的丝氨酸蛋白酶,NS5B的RNA聚合酶等,它们在体内也能引起很强的体液和细胞免疫反应.机体识别B细胞表位激发的抗体在介导病毒粒子清除,诱导有效细胞免疫应答等方面发挥作用.噬菌体展示技术已被证明为研究蛋白质与其配体相互关系很有效的工具,在该实验中,我们建立了以噬菌体展示技术为核心的研究病毒B细胞表位的平台,实验过程包括作为HCV非结构区蛋白抗原及特异多抗的制备,肽库的筛选,基于噬菌体PIII蛋白结构域I-II系统目的肽的性质的研究.1.HCV部分非结构区蛋白抗原的制备,这部分是全部工作的前提与基础,经过多个表达系统的尝试后,三个非结构区蛋白,包括HCV NS3C/NS4（氨基酸序列1602-1811）、NS5AB（氨基酸序列2263-2497）,NS5B-dc21（氨基酸序列2420-2989）得到了成功表达.HCV NS3C/NS4蛋白是以硫氧还蛋白融合表达的方式获得的.2HCV部分非结构区蛋白B细胞表位的筛选,利用噬菌体随机展示十二肽库研究蛋白质的抗原表位.首先是作为筛选分子的特异多抗的制备,将纯化的三种HCV非结构区蛋白耦联Sepharose4B.3.对所获B细胞表位的进一步研究.设计了一种新颖的方法研究筛选得到的B细胞表位的性质,我们使用的伏库随机肽位于噬菌体PIII蛋白的N端,利用基因工程方法表达含有PIII蛋白结构域I-II的蛋白,目的肽依然位于重组蛋白的N端,可很好地保持其在噬菌体上的构象.通过上述研究,我们以HCV非结构区蛋白为研究对象.建立了一套研究病毒B细胞表位的方法.作为一个新颖的技术路线.可以运用到其它相关研究中,该研究中所获得的HCV B细胞表位,为进一步研究这些表位在免疫应答中的作用,以及HCV诊断试剂的改进奠定了基础.