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柑橘溃疡病是柑橘上的一种重要检疫性病害,严重损害柑橘品质。本试验以筛选出抗病单株Ka-1和常规感病品种暗柳橙为试验材料,对Ka-1进行柑橘溃疡病抗性的分析研究。通过接种不同浓度病原菌悬浮液,不同接种方法,不同接种部位三个方面对Ka-1进行溃疡病抗性鉴定和评价;通过对柑橘感染溃疡菌后的组织病理学进行了研究阐述了Ka-1的组织抗病机制;通过测定Ka-1在接种溃疡菌前后不同时期内4种防御酶的活性变化,研究其酶活性与抗性表达之间的关系,从生理生化角度来阐明Ka-1的抗病特性。
结合以上研究,对Ka-1的抗性进行综合评价,并对其抗病机制展开了初步分析,为柑橘溃疡病的抗病育种研究和应用提供有效依据。现将主要研究结果归纳如下:
1.通过室内人工接种溃疡病菌的方法对Ka-1抗病性进行了鉴定。结果表明,Ka-1对柑橘溃疡病具有高度抗性,表现为免疫或高度抗病。但其抗性表现也因接种浓度、接种方法、叶龄的不同而有所差异,表现为免疫反应至接种后叶面出现褐色小点或者接种点外围褐化的褐色坏死斑。
研究结果还表明,接种浓度、接种方法、叶龄对感病品种暗柳橙的病程也产生影响,表现为接种后症状发展的速度显著不同,接种浓度越大,显症越早,伤口接种显症早于喷雾接种,幼嫩叶片显症早于老叶。
2.对Ka-1与暗柳橙的叶片组织结构观察的结果表明,Ka-1的叶片厚度、气孔密度、气孔长轴、栅栏组织厚度、海绵组织厚度、叶片组织结构紧密度、疏松度、栅栏组织/海绵组织厚度比等指标与普通暗柳橙具有显著差异。Ka-1气孔小、气孔密度低、叶片组织结构紧密、角质层厚与其抗溃疡病特性直接相关。
3.对柑橘感染溃疡菌后的组织学病理研究结果表明:伤口接种溃疡病菌后,Ka-1叶片不出现海绵组织细胞增生或增大,接种点附近的海绵组织壁细胞壁加厚较感病品种暗柳橙早,加厚程度也显著大。暗柳橙接种后先出现海绵组织细胞增生,然后增大,直到表现典型溃疡斑才有明显细胞壁加厚现象出现。说明Ka-1存在接种后细胞壁加厚的主动抗病机制。
4.对柑橘溃疡病病罹病前后,Ka-1和感病对照暗柳橙4种防御:苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)的的活性变化的研究表明接种柑橘溃疡病前后,Ka-1和暗柳橙叶片防御酶活性变化规律存在一定的差异。人工接种后,Ka-1和暗柳橙POD、PAL的活性迅速提高,但抗病品种增加幅度明显大于感病品种。但普通暗柳橙与Ka-1在PPO、SOD酶活性变化上无显著性差异。认为,Ka-1的PAL、POD酶活性提高与抗病性表达呈明显正相关;PPO、SOD酶活性变化与抗病性没有明显相关性。