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肝癌是全世界第五位高发的恶性肿瘤，已日益成为全球性人类健康的威胁。肝癌患者的总体生存率还很不理想，是因癌症相关性疾病死亡的第三位病因。复发和转移是导致肝癌患者术后生存率低的主要原因，越来越多的证据表明肿瘤转移是一个受多基因多因素影响的过程。 ANGPTL4是血管生成素(Angiopoietin)家族的成员之一，它不仅对糖脂代谢起到重要的调节作用，而且与血管新生、肿瘤生长和转移有着密切的关系。目前，关于ANGPTL4对血管新生和肿瘤转移影响的研究结果并不一致，尚存在很多争议，提示着ANGPTL4的活性可能存在组织依赖性。迄今未见有关ANGPTL4在肝癌转移中的功能及机制的报道。因此我们致力于研究ANGPTL4在肝癌转移中的功能和作用机制，补充人们对ANGPTL4基因功能的认识，并为ANGPTL4用于肝癌的诊断或治疗奠定实验基础。 本研究中，我们采用慢病毒载体构建了ANGPTL4稳定过表达肝癌细胞系Huh7-lenti-ANGPTL4和SMMC-7721-lenti-ANGPTL4。体外功能实验表明，与相应的对照组相比，Huh7-lenti-ANGPTL4和SMMC-7721-lenti-ANGPTL4细胞具有更强的跨血管内皮细胞迁移的能力;用含ANGPTL4蛋白的条件性培养上清分别处理Huh7和SMMC-7721细胞，同样能够促进它们的跨血管内皮细胞迁移的能力;裸小鼠体内肝原位接种试验证实SMMC-7721-lenti-ANGPTL4与其对照组相比，肝内转移灶、肺转移发生例数以及肺转移灶显著增多(P＜0.05)。在ANGPTL4相对高表达的肝癌细胞系MHCC-97L中，采用shRNA方法干扰ANGPTL4的表达，能明显抑制MHCC-97L细胞的跨血管内皮细胞迁移（P＜0.01）;用ANGPTL4抗体处理MHCC-97L细胞，能够抑制其跨血管内皮细胞的迁移。以上结果表明，外源性表达ANGPTL4和内源性的ANGPTL4均能增强肝癌细胞的跨血管内皮细胞迁移能力并促进肝原位瘤模型裸小鼠的肝内转移和肺转移。 进一步探讨ANGPTL4的作用机制时，发现分泌性ANGPTL4蛋白能够上调人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)中VCAM-1mRNA和蛋白的表达。采用siRNA技术在HUVEC细胞中干扰VCAM-1或在SMMC-7721-lenti-ANGPTL4细胞中干扰整合素β1(Integrinbeta1)，均能抑制过表达ANGPTL4诱导的SMMC-7721细胞的跨血管内皮细胞的迁移。 缺氧与多种实体瘤的病程进展和肿瘤转移密切相关。本研究证实了肝癌细胞系在缺氧环境(2％O2)下培养能明显上调ANGPTL4mRNA和蛋白的表达。采用siRNA方法研究证实在MHCC-97L和SMMC-7721细胞中缺氧是通过转录因子HIF-1α而不是HIF-2α来上调ANGPTL4的表达。在缺氧培养的细胞培养基中加入ANGPTL4抗体，能部分抑制缺氧诱导的肝癌细胞的跨血管内皮细胞迁移。同时还发现HIF-1α抑制剂2ME2能够有效抑制缺氧诱导的ANGPTL4蛋白的表达。 肝癌患者临床信息分析证实肝癌组织中ANGPTL4的表达与HIF-1α的表达呈正相关(r=0.282，P=0.033)，血清中sANGPTL4水平与sVCAM-1水平相关(r=0.290，P=0.004)，均与体外实验结果相一致。 综上所述，在肝癌细胞中缺氧通过转录因子HIF-1α明显上调ANGPTL4的表达;分泌性ANGPTL4蛋白能够上调HUVEC中VCAM-1的表达，介导肝癌细胞的跨血管内皮细胞的迁移，进而促进裸鼠的肝内转移和肺转移。 本研究首次发现并证实了ANGPTL4在肝癌转移的重要作用，这为ANGPTL4基因相关产品将来用于肝癌的诊断、治疗及预后提供了新思路和实验依据。