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牡丹(Paeonia suffruticosa Andrews.)属芍药科(Paeoniaceae)芍药属(Paeonia L.)牡丹组(Sect. Moutan DC.)植物,是多年生木本落叶灌木,其花大色艳、花香浓郁,为我国的传统名花。 长期以来,牡丹的育种工作一直是牡丹工作者的研究重点,致力于培育拥有高经济价值和观赏价值的牡丹新品种,从而满足市场需求,这对于牡丹的产业化发展具有重要的意义。由于牡丹遗传背景复杂,传统的研究方法有一定的局限性。因此,近年来,人们对开始从分子水平对其进行研究,主要集中在遗传多样性研究、亲缘关系分析和种质资源分类等。而对于用SSR分子标记构建牡丹遗传连锁图谱的报道尚未见到。因此,以牡丹品种‘凤丹’为母本,‘新日月锦’为父本,及其杂交后代F1群体120株植物材料作为本研究的试材,基于已开发的牡丹基因组SSR标记,利用JoinMap4.0软件进行结果分析,从而构建了首张牡丹SSR标记遗传连锁图谱。得到的主要结果如下: (1)从已发表的相关文献结合课题组转录组数据,共合成SSR引物705对。选取‘凤丹’与‘新日月锦’两亲本材料进行引物初筛试验。最终发现在合成的705对SSR引物中,有142对出现了清晰、多态性高、重复性好的条带,多态性率为20.14%。 (2)用142对SSR引物依次对杂交后代进行PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳,最终发现有18对引物的扩增效果并不理想,弃之不用。其余的124对SSR引物共扩增出261条具多态性的条带,平均每对引物得到多态性条带数为2.1。其中,母本所特有的分离位点有45个,父本所特有的分离位点有47个,双亲共有的分离位点为169个。 (3)统计124对SSR引物的扩增结果,利用JoinMap4.0作图软件中的“CP”模型构建牡丹遗传连锁图谱。图谱包含35个标记,作图位点率为28.2%,覆盖5个连锁群,图谱总长度覆盖牡丹基因组338.2cM,连锁群的长度范围为51.0cM~120.9cM,标记间平均间距为9.7cM,连锁群长度为29.8~120.9cM,遗传连锁图谱各连锁群含标记数从3~14个,平均每个连锁群包含7.0个标记。5个连锁群上相邻标记间距大于10cM的区间有12个。