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实验目的:
研究复方五味子制剂对小鼠急性酒精性肝损伤的防护作用,并从氧化损伤方面探讨相关作用机制。
研究五味子水提液的急性毒性和长期毒性作用。
实验方法:
药效研究:用56%的白酒每次9ml/kgBW,每天2次、连续10天灌胃造成KM小鼠急性酒精性肝损伤模型,用含五味子生药剂量600mg/kgBW、800mg/kgBW、1000mg/kgBW的复方五味子制剂在每天灌酒前给予预处理,以水飞蓟素(利加隆)作为阳性对照,第10天灌酒后禁食12h,取血并处死动物,采用生化法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、肝脏甘油三酯、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽含量(GSH)及总超氧化物歧化酶(SOD)活力的变化,检测肝脏脏器系数及观察肝组织病理形态学变化,综合评价复方五味子制剂对酒精性肝损伤的防护作用。
急性毒性:用含生药剂量15.0g/kgBW的五味子水提液对KM小鼠一次性经口灌胃给药,给药后连续观察14天,观察小鼠一般状况及死亡情况,观察期结束时对存活小鼠处死并行大体解剖检查。
长期毒性:将Wistar大鼠随机分为4组,3个实验组每天分别给予含五味子生药剂量10.0g/kgBW、4.0g/kgBW、1.6g/kgBW的五味子水提液,对照组给予等体积蒸馏水,连续灌胃4周,停药后观察2周。给药期和停药恢复期,观察大鼠的一般情况、体重增长、进食量、血液学指标、血生化指标、脏器系数及病理组织学变化等。
实验结果:
药效研究:56°的白酒每次9ml/kgBW,每天2次、连续10天灌胃可成功建立急性酒精性肝损伤的小鼠模型。复方五味子制剂对小鼠急性酒精性肝损伤具有防护作用,表现在可降低血清ALT、AST水平,恢复升高的肝脏系数,提高抗氧化酶SOD活力,具有一定的提高抗氧化物GSH含量的作用,改善肝细胞微泡型脂肪变性、肝细胞肿胀和气球样变性等病理改变。
急性毒性:14天观察期内,所有实验小鼠自始至终一般状况良好,未出现任何症状或死亡;实验结束时处死小鼠并进行解剖,未发现有脏器出现体积、颜色和质地等病理改变。
长期毒性:五味子水提液各组大鼠一般状况良好,体重增长、脏器系数、血常规、血液生化指标、解剖学和主要脏器的病理组织学检查结果无时间及剂量效应的影响,与对照组比较均属正常范围。
实验结论:
1、复方五味子制剂对小鼠急性酒精性肝损伤具有一定的防护作用,其作用机制与提高抗氧化能力,清除过多氧自由基,抑制氧化损伤有关。
2、生药剂量为15.0g/kgBW的五味子水提液(相当于临床剂量150倍)对KM小鼠无急性毒性作用。
3、生药剂量为10.0g/kgBW范围内的五味子水提液(相当于临床剂量100倍)对wistar大鼠无长期毒性影响。