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免疫佐剂是用于增强抗原免疫原性的重要疫苗组分，它通过与抗原混合给药或者提前给药的方式来增强机体对疫苗抗原的免疫反应，还可以延长免疫时效，改变免疫反应类型。在疫苗中添加免疫佐剂一方面可以在免疫力低下的人群中诱导更为显著的免疫效应，提高疫苗的预防效果;另一方面还可以减少接种疫苗所需要的抗原剂量，从而降低制造成本。目前临床使用的佐剂仍然存在种类少、功能有缺陷、稳定性差和有毒、副作用的问题。如铝盐佐剂用于人类和动物疫苗，只能刺激体液免疫，不能有效刺激细胞免疫，只能用于皮下或肌肉注射剂型而对其它给药途径效果不佳。含有去甲基化的CpG结构模式的寡聚核苷酸(CpG-ODN)的部分亚型进入了Ⅰ期临床阶段，它可以促进抗原提呈细胞的成熟和分化，进而活化T细胞，但可能产生大量促炎细胞因子，破坏免疫系统稳态。细胞因子是免疫活性细胞分泌的用于调节免疫反应和免疫系统活性的一大类信号分子，多种细胞因子曾被用作免疫佐剂进行动物实验，并取得了良好的效果。但因生产成本和品质要求极高，在疫苗剂型中的实际应用受到极大的限制。因此研制安全、稳定、高效和低成本的水溶性免疫佐剂依然有很大的临床意义和社会意义。 IL-10是免疫系统中重要的细胞调节和抑制因子，因此设想使用IL-10反义核苷酸作为新型免疫佐剂，去特异性、暂时性地抑制IL-10的表达，增强对抗原的免疫反应。在本文的研究中，使用全硫代磷酸骨架来增强寡核苷酸的稳定性，构建了不含CpG结构的IL-10反义核苷酸，并依据IL-10反义核苷酸的序列设计碱基含量相同但排列顺序不同，并且不含其它白介素或相关受体的序列的核苷酸作为control组，研究了其作为免疫佐剂，在疫苗经皮递送中的细胞、组织和体内水平的安全性、增强免疫反应的效能和调节免疫的作用机理。用CCK-8法检测了IL-10反义核苷酸的细胞毒性和及其促进T细胞增殖的能力。将注射后的局部皮肤组织石蜡切片进行HE染色评估组织受损情况，然后用ELISA检测了IL-10反义核苷酸在细胞水平和组织水平上下调IL-10表达的情况;检测了模式疫苗鸡卵清白蛋白经皮间接种后的小鼠血清抗体滴度、接种局部组织IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β和1L-10含量，并通过免疫荧光法探究IL-10反义核苷酸进入机体后作用的靶细胞。结果显示:IL-10反义核苷酸在有效疫苗接种剂量时没有显示明显的细胞毒性和组织毒性，可以抑制树突状细胞IL-10的表达并促进T细胞增殖，在动物实验中可提升抗体滴度约100倍，达到与实验型佐剂聚乙酰亚胺相近的免疫增强效果，而其毒性显著低于后者。综上所述，硫代磷酸骨架构建的IL-10反义寡核苷酸具有免疫增强效果好、作用机理明确且安全、稳定的优点，作为免疫佐剂，具有进一步优化和开发的潜力。