本文通过EST同源筛选的方法，用TSSK(testis-specific serine/threonine kinase)1，2，3的cDNA为信息探针在GenBank数据库中发现了一个新的同源基因，在人的睾丸组织cDNA文库中将其克隆，该cDNA序列包含了984个碱基的开放阅读框，编码一个328个氨基酸的蛋白质。该蛋白质具有一个保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域，氨基酸序列比较显示这个新的推导蛋白与TSSK1，TSSK2，TSSK3有较高的同源性，可能是这个亚家族的第四个成员，故命名为TSSK4。同样的方法获得小鼠的同源基因tssk4。组织表达谱分析表明TSSK4也只在睾丸组织中表达，免疫组化定位分析表明tssk4主要在小鼠睾丸中的单倍体的圆形精子细胞中表达。 为了研究TSSK4的生理功能，选择以酵母双杂交的方法筛选互作蛋白作为切入点，从人的睾丸cDNA文库中筛选到了一个能与TSSK4互作的蛋白——cAMP应答元件结合蛋白CREB。体外GST pull-down实验和磷酸化试验表明，TSSK4不仅能与CREB相互作用，而且能够使CREB磷酸化。为了进一步确定TSSK4磷酸化CREB的生理意义，在人的胚肾细胞Hek 293T细胞中用CRE(cAMP responsive element)报告系统检测TSSK4的调节功能。