ABI5基因在不同休眠特性小麦中的鉴定和表达特异性研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:gmn10021
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种子的休眠特性是影响小麦穗发芽抗性的一个主要因素。ABI5能够调节胚对脱落酸(ABA)的敏感性,在干燥耐受机制的建立与胚胎的休眠机制中发挥重要的作用。本研究以不同休眠特性的白粒小麦为试验材料,用通用引物对ABI5基因的全长进行扩增和测序。通过比较序列的同源性并进行相似序列的分类,发现ABI5基因在小麦中存在6种以上的多拷贝序列。根据已知序列,进一步设计和筛选出两对特异性引物,可以分别扩增出ABI5基因的两个特异性拷贝序列ABI5-1和ABI5-2。通过与乌拉尔图小麦、拟斯卑尔脱小麦和粗山羊草中ABI5-1和ABl5-2基因的序列比较,发现在小麦中扩增到的ABI5-1和ABI5-2和乌拉尔图小麦的ABI5基因的同源性最高。另外,对ABI5基因在不同休眠特性白粒小麦中转录本的表达分析中发现:ABI5基因转录本的表达量与小麦种子的成熟时间相关,随着成熟时间的延长其表达量增加,并在开花后30d时达到最高表达量;不同休眠特性的小麦材料中ABI5基因转录本的表达量也不相同,种子休眠性弱的小麦材料中优9507和京411其表达量小于种子休眠性强的小麦材料阆中白麦子和万县白麦子。ABI5-1和ABI5-2转录本在相同材料不同成熟期以及不同材料相同成熟期的表达量与ABI5基因相同。对中优9507、京411、阆中白麦子和万县白麦子这四种材料的成熟种子进行淀粉粒电镜扫描观察时发现:中优9507和京411胚乳内淀粉粒被蛋白基质紧密包裹,而阆中白麦子和万县白麦子胚乳内淀粉粒与蛋白基质结合松散,淀粉颗粒裸露较多。本研究还发现在种子萌发过程中,阆中白麦子和万县白麦子比中优9507和京411胚乳淀粉粒的分解程度更大,分解速度也更快。我国春小麦主要种植省区在收获季节受到穗发芽损害以外,在小麦播种季节和生育早期也经常会遇到干旱胁迫。本研究利用与小麦穗发芽抗性相关的分子标记Vp1B3、Vp1A3和Tamyb10D以及与小麦抗旱性相关的分子标记TaNRX-B1a1、 TaNRX-B1b1和FerAl-intrl对137份内蒙古春小麦育种材料的穗发芽抗性和抗旱性进行检测,结果表明,中国春既属于TaVp-1Bb的等位基因类型,同时用Tamyb10D检测时属于抗穗发芽的片段类型;辽春10号在3个与小麦穗发芽抗性相关的分子标记的检测中均属于抗穗发芽的等位基因类型。738609等共58份材料在两个与抗旱性相关的分子标记中均属于抗早基因类型材料,占供试材料的42.34%,其单倍型组合为TaNRX-B1a1/TaFer-A1a,可以用作抗旱育种的亲本材料。此外,在2个抗旱分子标记的检测中发现辽春10号均属于抗旱等位基因类型,所以辽春10号在抗穗发芽和抗旱性的聚合育种中可以作为亲本使用。
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