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目的:采用16s DNA高通量测序的微生物组学技术,检测重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia SAA)患者的粪便微生物,分析微生物丰度变化,寻找与SAA相关的特异性肠道微生物。方法:选取2018年1月至2019年1月就诊于天津医科大学总医院血液科的初治SAA患者10例,正常组为年龄相近的健康人14名,另外选取初治骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome MDS)患者15例,免疫相关性全血细胞减少症(immunorelated pancytopenia IRP)患者15例,留取粪便样本,-80℃冻存。通过Illumina高通量测序技术(Hi Seq Illumina测序平台)对留取的粪便样品中细菌DNA的V3-V4区段进行测序。测序结果进行序列归类,以操作分类单元(Operational Taxonomy Unit,OTU)形式聚类,并以Veen图、偏最小二乘法(PLS-DA)以及alpha多样性分析分析物种组间差异性;以物种丰度柱状图的形式分析各个样本在不同分类水平的物种组成,同时进行菌群差异物种筛选;选出SAA中差异性的肠道菌群,并与MDS、IRP患者肠道菌群进行比较,评价SAA患者肠道菌群的特异性,同时进行SAA中差异菌群物种关联分析,探究肠道差异菌群变化影响。结果:1.Veen图和PLS-DA分析测序分析结果表明,患者组肠道菌群较正常对照组有显著差异,且SAA患者与IRP患者、SAA患者与MDS患者及IRP患者与MDS患者之间肠道菌群之间也有差异。Alpha多样性分析结果显示SAA患者肠道菌群丰富度低于健康对照组,但尚未看出统计学差异。2.通过物种组成分析发现在门水平上SAA、MDS、IRP患病组肠道菌群中变形菌门(Proteobacteria)相对丰度升高,拟杆菌门(Bacteroidetes)相对丰度减低;纲水平分析IRP患者γ-变形杆菌(Gammaproteobacteria)较其他组相对丰度增加,且差异具有统计学意义;目水平上,相对于正常对照组,SAA、MDS、IRP组肠杆菌目(Enterobacteriales)、乳杆菌目(Lactobacillales)物种相对丰度增加,拟杆菌目(Bacteroidales)物种相对丰度减少。进一步分析表明相对其他组,SAA患者肠杆菌目(Enterobacteriales)物种相对丰度增加,同时IRP患者组肠杆菌目水平低于MDS组患者及健康对照组;且差异具有统计学意义。同样,相对于正常对照组,SAA、MDS、IRP组肠杆菌科(Enterobacteriaceae)水平增加,在科水平对前10位差异物种进行筛选,发现SAA患者肠杆菌科(Enterobacteriaceae)较其他组相对丰度增加,且差异具有统计学意义。属水平上,相对于其他组,SAA患者肠道中罗斯氏菌属(Roseburia)水平显著降低,摩根氏菌属(Morganella)相对丰度增加。进一步分析差异排名前10位的物种发现,相对正常组,SAA患者罗斯氏菌属(Roseburia)水平明显降低,且差异具有统计学意义。且柠檬酸梭菌(Clostridium citroniae)增加而粪便罗斯氏菌(Roseburia faecis)降低;IRP患病组的大肠埃希氏菌/埃希氏菌属(Escherichia coli/Escherichia)相对丰度明显高于对照组和SAA组及MDS组,差异具有统计学意义,这与IRP免疫相关性的发病机制具有潜在的联系。MDS患者肠道甲酸芽殖菌(Gemmiger formicilis)、副流感嗜血杆菌(Haemophilus parainfluenzae)水平较健康对照组、SAA组及IRP组明显升高;同时粪便罗斯氏菌水平高于正常对照组;但其水平在MDS与SAA及MDS与IRP之间无明显统计学意义。3.物种关联分析显示,普氏杆菌(Prevotella.copri)和柠檬酸梭菌有较强的竞争作用,且SAA患者中普氏杆菌减少而柠檬酸梭菌增加。结论:SAA患者肠道菌群与健康对照组肠道微生物组成具有差异,且SAA患者肠道菌群相对丰度低于健康人,进一步研究发现SAA组柠檬酸梭菌水平较其他组升高,而粪便罗氏菌、普氏杆菌降低。同时普氏杆菌与柠檬酸杆菌之间有较强的负相关性,提示菌群比例失调对SAA发病的影响,这需要进一步深入研究;另外MDS患者及IRP患者肠道菌群也有特异性菌群待进一步研究。