【摘 要】
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荧光光谱法具有灵敏度高、选择性好、用量少、方法简便、信息多样等优点,应用广泛。近年来,纳米生物技术发展迅速,成为纳米材料学和生物学各自学科的强势增长点。本学位论文
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荧光光谱法具有灵敏度高、选择性好、用量少、方法简便、信息多样等优点,应用广泛。近年来,纳米生物技术发展迅速,成为纳米材料学和生物学各自学科的强势增长点。本学位论文在简要综述荧光光谱法及其化学生物学应用的基础上,采用荧光光谱法和紫外光谱法研究了槲皮素与几个生物分子体系相互作用。主要内容如下:1、推导了方法1(固定蛋白质浓度,改变槲皮素(Qct)浓度,测量蛋白质荧光改变)和方法2(固定Qct浓度,改变蛋白质浓度,测量Qct荧光改变)研究分子间作用的一般方程,由非线性最小二乘拟合法测算了结合常数K和位点数n,并藉此定量评估了“光内滤所致猝灭”效应的影响。考察了共存碳纳米管(CNTs)对Qct和牛血清白蛋白(BSA)、酪蛋白(Cas)的荧光猝灭效应,及其对Qct-BSA和Qct-Cas相互作用的影响。以同步荧光法考察了CNTs、Qct对BSA及Cas构象的影响,并测算了CNTs、Qct与蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的结合常数K和位点数n。2、评估了共存金纳米粒子(AuNP)对Qct和牛血红蛋白(BHb)的荧光猝灭效应及对Qct-BHb作用的影响。测得了不同温度下Qct-BHb结合反应的平衡常数(K)和结合摩尔比(n),并由所得热力学常数确定了结合的作用力类型。根据F(o|¨)rster偶极-偶极无辐射能量转移理论,求得了Qct-BHb作用的分子间距r和能量转移效率E。3、研究荧光活性物质槲皮素(Qct)与色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的相互作用。在pH7.4的磷酸缓冲溶液(PBS)中,测得不同温度下的反应平衡常数(K)和结合摩尔比(n)。槲皮素与游离氨基酸间有较强的结合作用,求出了结合的热力学常数,可为研究生物分子与蛋白质的结合作用提供理论依据。
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