人冠状病毒229E(HCoV229E)属于冠状病毒科alpha冠状病毒属。冠状病毒是造成上呼吸道和肠胃系统疾病的重要病原体，曾经造成大量感染和死亡的SARS病毒和MERS病毒均属于这一病毒科。在正链RNA病毒中，冠状病毒拥有最大的基因组，大小从26 kb到30kb不等。其转录复制机制也极为复杂，多达十几个非结构蛋白通过相互作用组装成一个巨大的转录复制复合体，来完成病毒的转录复制过程。　　非结构蛋白15(Nonstructural protein15，nsp15)是冠状病毒转录复制复合体中的一个重要结构单元，具有核酸内切酶的功能，且特异性识别尿嘧啶核苷酸。nsp15在病毒生命周期中的具体作用尚未被揭示，其可能在病毒RNA合成过程中参与RNA聚合酶与模板基因组的解离及重定位。　　本文对HCoV229E中nsp15进行了深入的研究，通过X-射线大分子晶体衍射技术解析了其三维结构，这是alpha冠状病毒属中第一个被解析的nsp15结构。HCoV229E nsp15的结构为同源六聚体，其中三个单体分子呈三角形排列形成一个三聚体，两个三聚体分子以“背对背”的方式组成六聚体。应用凝胶电泳及荧光能量共转移方法，对HCoV229E nsp15的酶活功能进行研究，证实HCoV229E nsp15具有尿苷酸特异的核糖核酸内切酶活性。同时，nsp15是一种同源多聚体的酶类，通过分析其六聚体之间相互作用的方式及对nsp15 I26A/N52A突变体结构的解析，发现nsp15两个三聚体相互作用界面上的疏水作用与氢键网络是维持nsp15六聚体的主要作用，且这种作用方式在nsp15同源蛋白中具有保守性。　　nsp15六聚体形式的稳定性既体现了其结构上的特征，也为其行使功能提供了重要的保证。由于目前尚无“RNA-nsp15”复合物的三维结构被解析，nsp15在病毒周期中发挥功能的具体机制也尚待研究，因此，对于nsp15晶体结构、体外活性及聚集形式的研究，为更加深入的理解冠状病毒的转录复制机制提供了基础，也为潜在抗病毒药物的设计提供了线索。