目的观察南方红豆杉含药血清对人肺癌A549细胞生长增殖的作用及对EGFR等靶点表达的影响,明确其作用机制。方法纯种新西兰家兔8只,体重约2kg,随机分成4组,分别为生理盐水组,低剂量红豆杉186.65mg/kg/d组,中剂量红豆杉373.3mg/kg/d组,高剂量红豆杉746.6mg/kg/d组,连续灌胃7天,末次灌胃1小时后,清醒状态下无菌心脏采血,分离血清,同组兔血清混合,过滤除菌,-20℃保存备用。分别用10%生理盐水血清、10%低剂量南方红豆杉含药血清、10%中剂量南方红豆杉含药血清、10%高剂量南方红豆杉含药血清作用细胞24h、48h、72h后以MTT法检测各组OD值,计算抑制率。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中表皮因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白量的表达。免疫印迹法(Western-blotting)检测表皮因子受体、磷酸化表皮生长因子受体(phosphorylated epidermal growth factor receptor,pEGFR)蛋白表达,Real-time RT-PCR 方法测定细胞中EGFRmRNA、VEGFmRNA表达水平。各组间差别的单因素方差分析用SPSS17.0软件处理。结果南方红豆杉含药血清组对人肺癌A549细胞抑制作用显著,呈明显浓度-效应以及时间-效应依赖性。Elisa结果显示与生理盐水血清组比较,高中低三组南方红豆杉含药血清VEGF表达均明显下降(P<0.05)。中剂量南方红豆杉含药血清组较高剂量、低剂量VEGF表达明显下降(P<0.05),而EGFR表达无明显差异(P>0.05)。Western-blotting检测细胞中EGFR、pEGFR蛋白,对比生理盐水组,各实验组EGFR表达未见明显变化(P>0.05),pEGFR表达明显下调(P<0.05)。Real-time RT-PCR测定经南方红豆杉含药血清干预后的人肺癌A549细胞后EGFR mRNA、VEGF mRNA表达情况,对比生理盐水组,各实验组表达明显下调(P<0.05)。结论经预试验后,成功制备含药血清,且重复性强。实验结果表明:南方红豆杉含药血清可能通过下调EGFR及VEGF的表达而起到抑制人肺癌A549细胞生长增殖的作用。