济宁青山羊是具有独特毛色和花形的羔皮用山羊品种,其主要产品是猾子皮、板皮和山羊绒。羔羊生后1-3天内屠宰后得到的猾子皮具有天然的色彩和花纹,毛色品质好,光润,皮板轻巧而美观。猾子皮所制的翻毛皮衣和帽领等在国际市场上极为畅销,享有盛誉。本研究主要采用组织学技术和差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)等分子细胞生物学技术,对济宁青山羊的皮肤毛囊组织结构和基因表达差异进行了研究,研究结果有助于揭示动物毛囊器官的生长发育规律;并为揭示济宁青山羊猾子皮花纹品质的分子遗传机理奠定基础。本文首先以组织学方法,研究了济宁青山羊猾子皮和成年羊皮肤毛囊的组织学结构。结果表明:猾子皮的毛囊与表皮呈45度倾斜,密度较稀。成年羊皮肤初级毛囊的毛球较大,毛囊较粗长,具有汗腺、皮脂腺、竖毛肌等附属结构,毛干有髓质;次级毛囊的毛球较小,皮脂腺不发达或缺如,毛干没有髓质。比较了揉后小猾皮和大猾皮的品质和组织学结构特点。结果表明:小猾皮干皮重平均为88.75±11.33,比大猾皮(出生30-60日龄)的皮板(重159.83±10.72)轻薄;有花面积比例为67.84±2.97,明显高于大猾皮(60.00±7.39),且优等的波浪花所占比例较高;单位皮重面积产率(14.83±1.49)亦高于大猾皮(12.98±0.61)。但是,小猾皮的抗张强度、撕裂强度、崩裂强度均不及大猾皮。大猾皮与小猾皮皮厚的差异极显著(P<0.01);大猾皮各个部位皮厚的部位差差异不显著(P>0.05);而小猾皮各个部位皮厚的部位差明显大于大猾皮,且差异显著(P<0.05)。济宁青山羊是生产猾子皮的一个专用品种,今后应加强该品种的选育和改良,增大羊的体型,提高猾皮总面积、波浪花的比例和皮板的物理机械指标,以便获得品质更好的猾子皮,进一步提高经济效益。进一步采用差异显示反转录PCR技术,研究了济宁青山羊胎儿期、小猾皮和大猾皮皮肤组织的基因表达差异,结果表明:8种引物组合在3个年龄段的青山羊皮肤组织中共扩增出482条清晰可辩的条带,其中,在三个发育阶段的皮肤组织中未发现“有或无”的差异表达条带;但发现了99条表达“强或弱”的差异表达片段,占总条带数的20.54%。若进一步对这些差异表达条带进行回收、杂交验证和克隆测序,则有望得到与毛囊生长发育相关的差异表达基因。采用三因子三水平的拉丁方正交试验设计(L9(34))方法,对比研究了无血清的Williams E培养基、无血清的DMEM培养基和添加10%FCS(胎牛血清)的DMEM培养基,及其在三种培养基中分别添加0、2ng/mL和10ng/mL三种不同浓度的血管内皮细胞生长因子(VEGF)和表皮细胞生长因子(EGF)时对成年羊毛囊体外培养的影响。将山羊的单根毛囊完整地从皮肤组织中分离出来,同时平行培养在9种培养基中,借助于倒置显微镜和目镜测微尺随时不断地观察毛囊生长的形态变化和测量毛根的长度。结果发现:山羊游离毛囊在9种培养基中均能很好地生长;但以无血清的培养基和在Williams E培养基的效果最好;分别和同时添加2%-10%的VEGF和EGF时可加快毛囊的生长;添加10%FCS和不添加细胞生长因子时毛囊也能生长,但生长速度较慢。本研究结果为揭示青山羊毛囊发育规律奠定了基础;为进一步揭示济宁青山羊花纹品质的遗传机理奠定了基础。