利用PAMAM纳米载体递送GCS siRNA逆转肿瘤多药耐药的研究

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zb3637607
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过RNAi干扰技术使GCS siRNA复合物能够高效沉默目的基因GCS,从而有效逆转肿瘤的多药耐药效应MDR。同时联合传统的化疗药物紫杉醇注射液达到更有效的治疗作用。针对RNAi面临的问题,我们希望可以构建一种新型的纳米递送体系来达到此目的。  关于本课题的研究进行了以下工作内容:对于GCS在MCF-7敏感细胞株MCF-7/ADR耐药细胞株的表达情况通过WB和RT-PCR进行检测。检测结果表明:GCS在这两个细胞株中的表达存在差异,它在后者中的表达高于其在前者中的表达。接着,进行纳米载体系统的制备与优化,在之前基础上构建了合适N/P比的二元复合物,再加以EGF修饰降低细胞毒性和增强靶向性。然后对构建的三元复合物进行表征检测,包括MTT细胞毒性检测检测、琼脂糖凝胶电泳检测、Zeta电位检测,并对最终制备的优化体系进行了TEM和粒径检测。紧接着将此优化体系转染进入细胞进行相关的检测。通过Confocal观察优化体系的转染效率和在细胞中的定位情况、阿霉素摄取情况,结果表明:复合物转染进入细胞后降低了耐药细胞的耐药性,增强了对阿霉素的摄取。转染效率通过定性、定量检测方法(RT-PCR、WB和qPCR)进行。结果同时表明:GCS siRNA在一定程度上沉默了目的基因的表达并且与之相关的MDR的表达量也有所降低。随后,MTT检测了siRNA复合物联合传统化疗药物紫杉醇注射液的作用效果,结果表明:二者联合的作用效果确实要明显优于单独紫杉醇注射液产生的作用效果。同时,通过流式进一步检测联合用药对细胞凋亡和细胞周期的影响。  综上所述,我们所构建的这种纳米载体系统不仅能够有效地沉默目的基因GCS的表达,而且可以在一定程度上降低多药耐药MDR基因的表达,从而可以降低耐药细胞株的耐药性,联合化药紫杉醇可以发挥更好的治疗效果。我们希望所作的研究工作可以为逆转多药耐药提供指导与帮助,能够作为一种新型的治疗方法来逆转肿瘤的多药耐药效应。图39幅,参考文献56篇。
其他文献
在现实生活中,总有人对政治课不屑一顾,产生颇多误解.通过对一部分网友进行调查,大多数人对政治课的认识都有偏差,笔者认为很有必要为今天的政治课正名.通过对笔者所教七年级
目的:叶酸是哺乳类动物生长发育过程中担负一碳单位传递的B族维生素,在一碳单位代谢中发挥主要辅酶的作用。叶酸缺乏已被公认为是与胎儿神经管缺陷发生紧密相关的一个重要危险
干旱和低温作为两种最常见的逆境,严重地影响着植物的正常生长发育以及生理代谢。本文选用对干旱、低温抗性不同的长武134、晋麦47号和郑引1号3个小麦品种为试验材料,在人工控制条件下,通过PEG处理模拟干旱胁迫和人工气候箱程序降温模拟低温胁迫,研究小麦幼苗对干旱、低温逆境交叉适应的生理生化基础和可能机理。同时,用外施ABA作为一种预处理条件,探讨ABA在交叉适应中的调节作用。主要研究结果如下:(1)经
肺癌是危害人类健康的重大疾病,其患病率近年来迅速攀升。肺癌大多由于吸烟引起,遗传、氡气、石棉、空气污染也能导致肺癌。肺癌具有易转移、侵袭的特点使得其难以治愈。如果能
大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata),属担子菌门(Basidiomycota),层菌纲(Hymenomycetes),伞菌目(Agaricales),球盖菇科(Strophariaceae),球盖菇属(Stropharia)。富含蛋白
与土著根瘤菌相比,接种根瘤菌竞争结瘤能力的强弱很大程度上决定了接种的效果。在提高接种效果的同时,根瘤菌的环境释放对土著微生物群落的生态效应也值得我们关注。早期的研究表明:(1)根系微生物群落因植物种类差异呈现波动变化;(2)根系微生物群落受季节变化的影响而波动;(3)一些根系微生物群落既不受植物也不受季节变化的影响。本试验将费氏中华根瘤菌HN01与其突变株GXHN100接种到大豆根系,以研究田间条
摘要:本文结合笔者自身的教学经验讨論了唱歌在英语教学中的积极作用。以期给广大英语教师的教学带来启示。  关键词:英语教学;唱歌;教师;学生  中图分类号:G632.0 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2017)07-0021  “最喜欢英语课的哪个环节?”  “唱歌啊,那首超能陆战队的主题曲超好听,百听不厌”“最喜欢英语早读了,因为可以唱歌”“最喜欢小组拉歌了”“我们的纪律口令也是歌
以全球变暖为主要特征的气候变化是全球变化研究的核心问题和重要内容,它已经严重影响了我国北方的兴安落叶松林。本研究在兴安落叶松分布区域内,按纬度梯度选取兴安落叶松林作
摘要:多年的初中英语教学经验告诉笔者,要想取得好成绩,就要和学生保持良好的沟通,营造和谐的师生关系,使学生“亲其师而信其道”,才能优化英语课堂教学,成就初中英语高效课堂。以下是笔者在教学实践中的一些做法和感悟。  关键词:英语教学;和谐师生关系;做法和感悟  中图分类号:G632.0 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2017)07-0022  多年的初中英语教学经验告诉笔者,要想取得
学位