【摘 要】
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转基因作物由于具有抗虫害杂草等优良的品质,目前在很多国家都已大规模商品化生产.但随着对转基因食品安全性认识的不断深入,各国在积极发展转基因技术的同时,加强了对转基因
【出 处】
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中国农业科学研究院 中国农业科学院
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转基因作物由于具有抗虫害杂草等优良的品质,目前在很多国家都已大规模商品化生产.但随着对转基因食品安全性认识的不断深入,各国在积极发展转基因技术的同时,加强了对转基因产品的监控和管理.中国政府和世界很多国家都采用了对转基因作物进行标识的制度,因此积极开发快速检测转基因成分的试剂盒具有重大的实际意义.该研究旨在研究形成最终产品-方便快捷的转基因成分检测试剂盒过程的关键技术和科学问题.根据转基因抗草甘膦作物中普遍存在的保守序列,设计合成-对引物,对转基因抗草甘膦大豆进行PCR扩增.将获得的片段制作成探针,并对该探针在杂交时的结合比率进行初步研究,为其在检测试剂盒中的应用奠定基础.通过磁性微粒连接Bt Cry 1Ac晶体蛋白抗体,研制成Bt CrylAc晶体蛋白放射免疫检测试剂盒,不仅比常规检测缩短了反应时间,也简化了操作步骤,具有定量、快速、灵敏的特点.建立了两株分泌抗Bt Cry 1Ac晶体蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其染色体数平均为96,分泌抗体稳定.抗体亚型为IgG<,1>,对CrylAc的灵敏度是1.0ng/m1,与CrylAb的交叉反应率为0.25﹪,与Cry2A的交叉反应小于0.1﹪.应用一株细胞制备腹水,腹水抗体中蛋白含量大约为4-6mg/ml,腹水抗体亲合力常数为1.0928×10<10>l/mol.两株细胞株分泌抗体效价较高,为进一步开发出试纸条检测卡奠定了基础.
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