复方银茶方中三种银杏黄酮苷元在大鼠的药代动力学的研究

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银杏(Ginkgo biloba L.)系银杏科银杏属落叶乔木,为中生代孑遗的稀有树种被称为裸子植物的“活化石”,是我国特有植物。20世纪以来,国内外学者对银杏叶药理进行了大量的研究,发现其主要药用成分为黄酮类和内酯类化合物。药理试验表明,银杏黄酮类化合物有使冠状血管及其它血管扩张的作用,银杏总黄酮有抗自由基、抑制脂质过氧化作用,而银杏内酷具有拮抗血小板活化因子(PAF)作用。茶多酚(Tea Polyphenols)是茶叶中多酚类物质的总称,根据其结构可分为黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮酵类和酚酸类等。其中以黄烷醇类物质(儿茶素)最为重要。茶多酚具有清除自由基、防止脂质过氧化反应、调节免疫功能、抗肿瘤、降低血脂、防止心脑血管疾病。根据传统中医药理论,结合现代中医药研究成果,广州军区总医院将银杏叶提取物和茶多酚进行配伍,制成的现代中药复方制剂——复方银茶胶囊,治疗心脑血管疾病,在临床应用多年,结果显示该制剂疗效可靠,毒副作用小,产生了很大的社会和经济效益。   本文建立了反相高效液相色谱法测定大鼠口服银杏叶提取物及银茶方后三种银杏黄酮苷元在大鼠血浆中的浓度。样品前处理采用经过正交优化的水解条件对大鼠血浆进行水解,然后加入10倍量的乙酸乙酯提取,内标选用桑色素,色谱条件为:迪马C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长369nm,流速1.0mL/min,柱温35℃。三种银杏黄酮苷元在大鼠血浆中线性范围分别为50-1000ng/mL,相关系数r2>0.995;高浓度和中浓度日内、日间精密度RSD<10.9%,低浓度的日内、日间精密度RSD<15.6%,提取回收率在72.9%-82.2%之间,RSD<12%;生物样品在室温下4h、-20℃下存储24h和一个月,以及反复冻融3次均保持稳定。   采用所建立的生物样品前处理及HPLC的测定方法,考察了大鼠口服银杏叶提取物和银茶方后,槲皮素、山奈酚和异鼠李素在大鼠中的的的药动学情况,结果如下:   从药时曲线上看,可以明显的发现银杏叶组和银茶组在高、低剂量的时候,大鼠都出现双吸收峰,且茶多酚组的第二峰浓度时间Tmax2明显比银杏叶组的Tmax2短。通过药代动力学软件DAS2.0分析采集的数据,采用了不同的房室模型和权重系数,拟合出来的曲线与实际的曲线相差太远,提示银杏黄酮在大鼠的代谢过程不符合房室模型,因此采用非房室模型来计算药动学参数。   通过对比不同药物组和剂量组之间的药动学参数变化,可以初步推断:在低剂量时,茶多酚与银杏叶配伍,能够促进银杏黄酮的吸收,使达到第二峰浓度的时间变短,在体内的消除也较快。在高剂量时,茶多酚与银杏叶配伍后,使达到第二峰浓度的时间变短,但是峰浓度减低,在体内的清除也较慢。
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