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目的:研究不同剂量X射线照射对人肺腺癌A549细胞CCR7 mRNA及蛋白表达的影响;在此基础上,设计CCR7 mRNA的干扰RNA(CCR7-siRNA)并转染A549细胞,研究X射线照射及联合CCR7-siRNA对A549细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,为肺癌侵袭转移发生机制的深入研究提供实验依据,为放疗联合RNA干扰技术治疗肺癌的临床应用提供新思路。方法:以Precise直线加速器产生的X射线照射体外培养的A549细胞(剂量率为442.89 cGy/min),以RT-PCR技术检测A549细胞CCR7 mRNA表达水平;以Western blotting方法检测A549细胞CCR7蛋白表达水平;以生物信息学手段,设计靶向CCR7 mRNA的干扰RNA(CCR7-siRNA),构建CCR7-siRNA慢病毒载体,转染A549细胞;以MTT法、Matrigel侵袭实验及细胞划痕法分别检测不同剂量辐射及CCR7-siRNA对A549细胞体外增殖、侵袭及迁移能力影响。结果:1.以未照射组为对照组,2 Gy组在照射后24 h及96 h A549细胞的增殖水平显著高于对照组(0.087±0.002 VS 0.075±0.001,0.449±0.009 VS 0.252±0.018,P<0.05),120 h低于对照组(0.509±0.060 VS 0.738±0.087,P<0.05);4 Gy组在照射后24 h高于对照组(0.087±0.001 VS 0.075±0.001,P<0.05),之后的增殖水平除72 h组外均低于对照组(0.088±0.008 VS 0.127±0.006,0.182±0.012 VS 0.252±0.018,0.571±0.064 VS 0.738±0.087,P<0.05);6 Gy组在照射48、72、120 h的增殖水平分别为0.072±0.002、0.138±0.030、0.365±0.024,均显著低于对照组(P<0.05);8 Gy组在照射72 h之后各组的增殖水平分别为0.155±0.038、0.139±0.015、0.248±0.016,均显著低于对照组(P<0.05)。2.以Transwell侵袭小室法检测A549细胞体外侵袭能力,对照组未见穿膜细胞,各照射组穿膜细胞数分别为22.67±3.32、1.83±0.41、3.00±1.10、4.67±2.16,与对照组相比均有统计学意义(P<0.01),以2 Gy组穿膜细胞最多(22.67±3.32,P<0.01);细胞划痕法检测体外迁移能力发现,与对照组相比,照射后24 h,2 Gy、4 Gy和6 Gy组细胞的迁移能力显著高于对照组(P<0.05),而8 Gy组显著低于对照组(P<0.05);照射后48 h,只有2 Gy组显著高于对照组(P<0.05);且2 Gy组与其它照射组间有显著差异(P<0.05)。3. A549细胞在照射4 h后,4 Gy、6 Gy和8 Gy组CCR7 mRNA及蛋白相对表达量开始升高(P<0.05);在高峰后逐渐下降,6 Gy和8 Gy组在照射72 h后mRNA表达量仍显著高于对照组(P<0.05),2 Gy和6 Gy组在照射72 h后CCR7蛋白相对表达量仍显著高于对照组(P<0.05),而4 Gy和8 Gy组在照射48 h后降至对照组水平(P>0.05)。4.以生物信息学技术设计2条靶向CCR7 mRNA的CCR7-siRNA,构建慢病毒载体转染A549细胞。与对照组比较,转染的2条CCR7-siRNA组均可显著降低A549细胞CCR7 mRNA及蛋白表达水平(0.39±0.05 VS 0.87±0.04,0.59±0.19 VS 1.00±0.00,P<0.05);设计合成的两对干扰序列相比,以CCR7 siRNA-1序列的干扰效果较为显著(0.39±0.05 VS 0.50±0.04,0.59±0.19 VS 0.93±0.07,P<0.05),用于后续实验研究。5.与单纯照射组比较,CCR7-siRNA联合照射组可显著降低CCR7 mRNA及蛋白表达水平(0.56±0.05 VS 1.20±0.20,0.32±0.06 VS 1.88±0.13,P<0.05)以及A549细胞体外增殖、侵袭、迁移能力(P<0.05)。结论:一定剂量(2 Gy -8 Gy)X射线照射A549细胞后一定时间内可显著提高A549细胞CCR7 mRNA及蛋白的表达水平并能促进A549细胞的体外侵袭、迁移,并在一定时间内抑制A549细胞的体外增殖能力;本实验所设计、筛选的CCR7-siRNA可显著降低A549细胞CCR7 mRNA及蛋白表达水平,抑制其体外侵袭、迁移能力,并可降低辐射对A549细胞体外侵袭、迁移能力的促进作用,且能协同抑制A549细胞的体外增殖能力,为放疗联合RNA干扰技术治疗肺癌的临床应用提供了新思路。