RGD-PAMAM纳米复合材料与细胞相互作用的基础研究

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聚酰胺胺(polyamidoamine,PAMAM)是一种具有密集的活性末端的树枝状高分子,由于具有良好的生物相容性、易修饰性而被广泛应用。在PAMAM的末端连接上生物活性分子之后可能发挥多价性结合的效应,而使得特异性和结合力增强。目前很多研究集中在PAMAM-生物活性分子与细胞的特异强力结合方面,而对于材料-细胞结合后对细胞影响的研究比较少。  本研究将细胞外基质的保守序列CGRGDS短肽片段通过特异的偶联剂SM(PEG)2偶联到G4代的乙二胺核或胱胺核PAMAM表面,得到最高修饰度约为52%的大分子;将RGD修饰的乙二胺核PAMAM二硫键打开得到半扇的RGD-hPAMAM;利用该偶联剂将CGRGDS或将RGD-hPAMAM修饰到氨基玻片表面后发现该表面能够促进HUVEC细胞特异性贴附,可能在细胞增殖和迁移方面也有影响,并且这种多价性构型的分子欲单价性的RGD分子对细胞的影响是不同的。然后我们又将RGD-PAMAM按一定的浓度加入贴壁培养的HUVEC或3T3细胞后,细胞的形态会发生变化,脐静脉内皮细胞(HUVEC)在培养板表面发生聚团现象,该材料还刺激了3T3成纤维细胞和HUVEC的增殖。在三维培养的条件下,该材料可以被3T3细胞团内吞利用形成细胞团,并表达重要的细胞因子bFGF、VEGF等基因。研究发现,3T3细胞形成细胞团的大小和数量与加入的RGD-PAMAM的浓度有相关性。在长时间培养的过程中,RGD-PAMAM偶联分子有利于维持3T3成纤维细胞的生存。该研究的结果表明:RGD-PAMAM偶联分子作为一种生物相容性良好的材料,可以用于在体外诱导形成细胞团并维持其良好的生长,以及与其他细胞共培养的可能性。这种应用对于在体外构建和培养微组织(microtissue)是很有利的——通过RGD-PAMAM的作用,可能更容易在体外形成具有良好活性的多细胞微组织,并有可能诱导其行使组织的某些功能。因此,该RGD-PAMAM偶联分子有可能在生物材料与组织工程领域具有良好的应用价值和前景。
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