论文部分内容阅读
阿尔茨海默症(Alzheimers Disease，AD)是最常见的痴呆类神经退行性疾病。近年来，越来越多的研究表明，作为中枢神经系统的固有免疫效应细胞，小胶质细胞所介导的炎症反应在AD的发生和发展过程中发挥重要作用。在脑内，DAP12(DNAX-activating protein of12kDa)作为重要的接头蛋白分子介导TREM2、SIRPβ1、CR3等多种受体的胞内信号传导过程，参与炎症、吞噬等过程。DAP12突变体缺失正常功能后会导致Nasu-Hakola病(Nasu-Hakola Disease,NHD)。在AD病人脑内，DAP12水平显著上调，提示DAP12可能在AD发生发展过程中发挥着重要作用，但是目前其分子机制尚不清楚。因此，本研究以BV2小胶质细胞作为研究对象，探讨Dap12在细菌脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)诱导的炎症反应中的作用，及其对凋亡神经元的吞噬功能的影响。我们发现，相对于星形胶质细胞及神经元，Dap12主要表达于小胶质细胞。尽管LPS显著下调Dap12相关受体Trem2的mRNA水平，但是Dap12的转录水平并没有显著的改变。我们进一步观察Dap12是否影响小胶质细胞对LPS刺激的敏感性，结果显示:在Dap12被敲低后，细胞对于LPS刺激的反应更为强烈，促炎因子白介素1(Interleukin-1β，IL-1β)、白介素6(Interleukin-1，IL-6)等显著上调，与此同时，细胞内JNK信号通路显著激活。我们进一步利用JNK抑制剂处理BV2细胞，发现该抑制剂可以显著逆转Dap12下调所导致的炎症因子表达升高，而ERK抑制剂则没有该效应。这些结果提示:Dap12可特异性通过JNK信号通路对LPS诱导的炎症反应产生抑制性影响。此外，我们还采用流式细胞分析技术探索Dap12在小胶质细胞吞噬凋亡N2a细胞过程中的作用，发现Dap12对细胞吞噬功能未产生显著的影响。 综上所述，本研究结果表明Dap12可以特异性通过JNK信号通路抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞的炎症反应，因而DAP12在AD发病过程中可能起到一定的保护性作用。本研究初步提示了DAP12在小胶质细胞中的功能，为进一步探讨DAP12在AD发病过程中的重要奠定了前期基础。