短期冻存兔骨髓间充质干细胞对其增殖及成骨分化潜能的影响

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目的探讨短期冻存对兔BMSCs的增殖、生物特征及成骨能力的影响,为进一步研究作基础。方法第5代兔BMSCs冻存,30d后复苏、体外培养至第10代,设相同代数未冻存的BMSCs为对照组。MTT、细胞周期、细胞表面标志及成骨诱导分化后ALP含量、Ⅰ型胶原及钙结节染色作为其增殖、生物特征及成骨能力的评价指标。结果冻存后BMSCs存活率为(84.38±3.78)%,生长潜伏期延长,传代后逐渐恢复;增殖指数和G1期细胞所占比例分别为(42.9±3.4)%、(57.0±3.4)%,细胞表面标志CD44阳性率为(93.62±1.05)%,不表达CD45;成骨诱导第7、14dALP含量(U/gprot)分别为6.73±1.92、15.99±4.36,第14、21天,Ⅰ型胶原、钙结节茜素红染色阳性;以上结果与未冻存组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论短期冻存对兔BMSCs增殖、生物特征及成骨分化潜能无明显影响,冻存后可继续进一步研究。
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