融合有GFP的豌豆卷须肌动蛋白PEAC1-GFP在大肠杆菌中的表达、纯化及性质的研究

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尽管人们对动物肌动蛋白的结构和性质已有了较为深入的了解,但对植物肌动蛋白的结构和性质的了解却运为不够,主要原因是植物肌动蛋白的纯化困难,很难得到足够有活性的蛋白从而对其进行结构与功能研究.为解决肌动蛋白原核表达这一难题,大量得到植物肌动蛋白和鉴定豌豆卷须肌动蛋白cDNA基因PEAc1的性质,我们对融合有绿色荧光蛋白(GFP)的豌豆卷须肌动蛋白基因在大肠杆菌中进行了表达.我们成功的构建了豌豆卷须面动蛋白基因PEAc1与GFP的融合基因(PEAc1-GFP)的原核表达载体pTAc1-GFP,并转入宿主菌BL21中,得到30﹪以上的表达.通过该论文的研究,一方面使肌动蛋白的原核表达难以得到有活性蛋白这一难题得以解决,为植物肌动蛋白结构与性质的深入研究提供了有价值的实验材料;另一方面,融合蛋白聚合后的丝状结构又能够作为可视化轨道,用于植物肌动蛋白体外运动特性的进一步研究.
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