松花粉富含核酸、黄酮以及人体所需的多种营养成分，具有抗衰老、调节免疫功能、抗疲劳、降血压、护肝、美容、减肥等多种生理作用。本文以松花粉水提物为原料，通过HSCCC对其进行分离纯化，并对分离的组分进行纯度检测和定性分析，得到的较纯的一种或一类组分作用于3T3-F442A小鼠前脂肪细胞，研究该组分对脂肪细胞增殖及分化的影响。本论文的主要研究内容如下：1、根据高速逆流色谱的分离特点以及松花粉水提物的性质，探索不同的溶剂系统中松花粉水提物的分离效果。分别用乙酸乙酯、乙醇、氯仿作为萃取试剂对松花粉水提物进行初步提取，萃取物质作为HSCCC分离的样品，分别在正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水体系、正丁醇-乙酸乙酯-（甲醇/乙醇）-水体系、氯仿-甲醇-水体系中进行分离，选择出具有最佳分离效果的溶剂系统。通过不断尝试，得出的最佳分离条件为：乙醇萃取部分作为样品在氯仿-甲醇-水（4:3:2）溶剂体系下具有最好的分离效果，以上相作为流动相，分离温度为25℃，流速为2mL/min，主机转速为900r/min，主机正转，管路反接。待出峰后，2min/管收集样品，共收集38管。首次运用HSCCC对松花粉水提物进行了分离。2、松花粉水提物的不同萃取部分在几种溶剂系统中的分离结果分别用HPLC进行检测。以乙腈-水（1:9）作为HPLC检测的流动相，流速为0.5mL/min，通过DikmaDiamonsil C18（4.6mm×150mm，5μm）柱，检测不同分离组分的纯度。对HSCCC分离得到的38管组分隔管进行检测，将含有相同成分且杂质较少的14-19管合并，记为C。在相同的HPLC分析条件下对C组分进一步纯化得到组分C0。运用HPLC-MS探索C0组分的性质，分析结果显示C0组分是分子量为135.0541的纯物质，含有分子量分别为118.0280和91.0188的离子碎片，由Bruker数据分析软件推测出其化学式可能为C4H9NO4或C5H5N5。3、研究C组分对3T3-F442A小鼠前脂肪细胞增殖及分化的影响。与空白对照组相比，各实验组对细胞生长均具有促进作用。作用24h后，药物浓度为2μg/mL、4μg/mL和128μg/mL时具有显著性差异（P＜0.05）；在药物浓度为32μg/mL时差异极显著（P＜0.01）。作用48h后，药物浓度在4μg/mL、8μg/mL和64μg/mL时差异显著（P＜0.05）。随着作用时间的延长，药物促细胞增殖效果越明显。油红O染色结果显示细胞内出现环状脂滴，分化的细胞形态变成圆形或椭圆形，随着分化的不断进行，细胞内脂滴逐渐积累，细胞体积不断增大。C组分对3T3-F442A前脂肪细胞的分化也具有促进作用，随着作用药物浓度的增加，促进分化的效果越明显；与空白组相比，药物浓度为4μg/mL、16μg/mL、32μg/mL、64μg/mL和128μg/mL时差异显著（P＜0.05）。4、进一步研究C组分对HepG2人肝癌细胞增殖的影响。与空白组和阳性对照组相比，除4μg/mL和32μg/mL（作用48h）外，其余浓度C组分对HepG2人肝癌细胞增殖均具有抑制作用。与空白对照组相比，药物作用24h和48h后，各浓度药物抑制细胞增殖的效果均不显著。同一浓度在不同的作用时间下呈现不同的作用趋势。