【摘 要】
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目的探讨应用血管内皮生长因子(VEGF165)干预肾小管上皮-间充质转化(EMT)过程中NOTCH信号系统的变化及其意义。方法(1)体外培养的人肾小管上皮细胞(HK2)分为转化生长因子-β1
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科;
【基金项目】
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国家自然科学基金(30570854)
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目的探讨应用血管内皮生长因子(VEGF165)干预肾小管上皮-间充质转化(EMT)过程中NOTCH信号系统的变化及其意义。方法(1)体外培养的人肾小管上皮细胞(HK2)分为转化生长因子-β1(TGF-β1,5μg/L)单独作用组(T组)和TGF-β1(5μg/L)+VEGF(100μg/L)共同作用组(T+V组),RT-PCR及Western blot方法检测不同作用时间点JAGGED-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。(2)TGF-β1与不同浓度VEGF165(0.1、1、10和100μg/L)共同作用细胞24 h,激光共聚焦显微镜(CFMS)、RT-PCR及Western blot检测E-钙黏素、α-SMA、JAGGED-1、NOTCH1表达。结果(1)作用后24和48 h,T+V组α-SMA和JAGGED-1蛋白表达均明显低于T组(P<0.05)。(2)同TGF-β1单独作用组比较,VEGF165(100μg/L)与TGF-β1共同作用组的E-钙黏素表达明显增强,α-SMA、JAGGED-1及NOTCH1表达均明显降低(P<0.05)。结论VEGF可抑制TGF-β1诱导HK2细胞发生EMT,并同时下调EMT过程中JAGGED-1、NOTCH1分子表达,提示该效应可能是VEGF抑制EMT的机制之一。
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