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目的收集临床样本并结合动物模型,从肠道菌群的角度探讨补肾化痰方治疗PCOS的作用机制。方法1.选取2019年1月-2020年12月就诊于南京中医药大学附属医院生殖医学科的肥胖型PCOS患者60例。随机分为对照组和治疗组,每组30例。对照组在进入IVF周期前餐时或餐后1h服用1粒奥利司他胶囊,每日3次。治疗组在对照组基础上,加用补肾化痰方治疗3个周期。统计分析患者IVF临床结局,收集部分患者粪便和颗粒细胞分别进行肠道菌群、m6A测序,观察肠道菌群变化及m6A表达情况。2.构建PCOS动物模型,应用16S rDNA测序技术检测肠道菌群,SCFAs检测技术检测小鼠粪便中SCFAs含量,Western-blot检测小鼠卵巢组织中NF-kB、IKKα、METTL3、METTL14、FTO、ALKBH5等蛋白的表达,RT-qPCR检测小鼠卵巢组织中IL-1、IL-6、TNFα、TGF-β1等mRNA表达。探究补肾化痰方治疗PCOS的作用机制。结果1.治疗后治疗组BMI、TC、TG、LDL-C均显著下降,HDL-C显著升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。治疗组FBG和HOME-IR水平显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比,治疗组Gn使用总量显著下降,MII卵数、2PN数、获卵率、成熟卵率及囊胚形成率均显著升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗组FET转化日内膜厚度、FET累积临床妊娠率与对照组相比显著增加,差异有意义（P＜0.05）。2.与对照组相比,PCOS患者肠道菌群α、β多样性无明显区别。在门水平,PCOS组厚壁菌（Firmicutes）丰度显著升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）,拟杆菌（Bacteroidetes）、放线菌（Actinobacteria）、变形菌（Proteobacteria）丰度下降;在属水平上,PCOS组粪杆菌（Faecalibacterium）、Blautia相对丰度显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）,拟杆菌（Bacteroides）、双歧杆菌（Bifidobacterium）相对丰度减少。补肾化痰方治疗后,肥胖型PCOS患者菌群α、β多样性无明显变化。物种组成分析及LDA线性分析显示,3组优势菌群发生了改变。3.PCOS小鼠模型肠道菌群整体结构发生变化。与对照组相比,PCOS组SCFAs含量明显下降（P＜0.05）,PPARγ水平下降,iNOS、Angpt14表达升高。补肾化痰方干预后,干预PCOS组肠道菌群结构改变,SCFAs含量增加,PPARγ水平升高,iNOS、Angptl4表达下降。4.联合分析示:门水平Firmicutes、属水平Lactobacillus和乙酸和丁酸具有正相关性,种水平Lactobacillusmurinu和乙酸具有显著正相关性（P＜0.05）;属水平的Lactococcus属则和丁酸具有负相关性。5.与对照组相比,PCOS小鼠卵巢组织IL-1、TGF-β1表达升高,差异有统计学意义（P＜0.05）,NF-kB信号通路相关蛋白p65、IKKα表达升高,PPAR γ、GLUT4表达显著下降（P＜0.05）,FTO、ALKBH5表达显著升高（P＜0.01）。丁酸钠干预后,促炎因子及NF-kB通路蛋白表达下降,PPARγ表达显著升高（P＜0.01）,FTO及ALKBH5表达显著下降（P＜0.01）。结论1.进周前服用补肾化痰方可以通过改善肥胖型PCOS患者血脂水平及糖代谢状态,对其 IVF-ET 助孕结局有一定改善作用。Firmicutes、Bacteroidetes、Blautia、Bifidobacterium可能参与肥胖型PCOS的发生发展。补肾化痰方可能通过重塑PCOS肠道菌群结构,参与m6A甲基化修饰延缓PCOS的进展。2.补肾化痰方可能通过调控菌群结构,促进短链脂肪酸（丁酸）合成,提高卵巢内PPAR-γ和GLUT4表达,改善卵巢胰岛素抵抗。此外丁酸还可以抑制NF-KB通路,并通过调控m6A甲基化修饰,减轻卵巢炎症,起到治疗PCOS的作用。