随着新型抗生素和疫苗的发展及其在临床上的应用，感染性疾病的治疗已取得巨大成功，但在过去的几十年，过敏性疾病却呈现出明显上升趋势，大约15％-20％的人对外源抗原产生1gE介导的过敏反应，其中约有2％-6％的人存在食物过敏(food allergy, FA)及相关症状。近年虽然过敏性疾病成为研究热点且已有较多的研究，但是过敏性疾病的发病机制及病因学仍不清楚，其治疗方法有限且效果不佳。　　 研究显示树突状细胞(dendritic cell，DC)和Th2细胞在过敏免疫反应中具有关键作用。DC是机体内功能最强的抗原提呈细胞(antigen presenting cell，APC),也是唯一能激活初始T细胞的APC，DC捕获和加工外源性抗原，并递呈抗原信息给T细胞，激活T细胞介导的免疫反应。成熟的DC高表达MHC-Ⅰ／Ⅱ类分子、共刺激分子如CD80和CD86等协助抗原信息的递呈，有效活化T细胞。初始CD4+T细胞被激活后分化为Th1、Th2、Th17或Treg细胞，Th2细胞主要释放细胞因子IL-4、IL-5和IL-13。这些细胞因子不仅在诱导B细胞产生抗原特异性IgE中起重要作用，而且在粘液分泌、肌肉收缩、和嗜酸性粒细胞增多中起重要作用。当再次暴露于特异性抗原后，IgE交叉连接激活肥大细胞释放过敏性介质，促发过敏性反应和产生过敏性临床症状。因此Th2细胞的极化是食物过敏免疫机制中重要一步。　　 T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域蛋白(T cell immunoglobulin and mucin domains，TIMs)基因家族是一组新的细胞表面蛋白家族。已发现TIMs基因家族在小鼠中包括8个成员(TIMs1-8)和在人类中3个成员(TIM1，3和4)。研究显示TIMs在过敏性疾病和自身免疫性疾病中起重要的调节作用。其中TIM4表达于APC，尤其是成熟的DC，TIM1表达于T细胞，特别是Th2细胞，近来发现它们是T细胞重要的调节因子。体外研究显示DC中TIM4蛋白的表达与自身免疫性疾病的严重程度正相关，TIM4结合TIM1共同促进T细胞的增殖，且提示TIM4可能作为一个新的分子来调节T细胞反应。我们前期研究，显示在过敏小鼠中存在Treg细胞功能不全，TIM4与TIM1的相互作用可降低Treg细胞的功能及状态，破坏免疫耐受平衡。但是TIM4对食物抗原特异性Th2细胞分化的影响研究甚少，体外实验证据不多，其机制仍需进一步研究。　　 我们推测微生物产物和食物抗原共同作用能够导致FA，其中TIM4与其受体的相互作用可能导致Th1/Th2细胞失衡和免疫耐受的打破，是引起FA的关键。本研究将通过体外培养BMDC，与CD4+T细胞共同培养来研究微生物产物和食物抗原对CD4+T细胞的影响，并应用TIM4抗体干预，探讨TIM4在FA发病过程中的作用，从而进一步了解食物过敏发生的分子机制，并为临床治疗提供理论依据。　　 目的:　　 通过检测TIM4 mRNA的表达，DC表面分子CD11c、MHC-Ⅱ、CD86的表达，研究微生物产物对TIM4的作用和微生物产物对DC的刺激作用。使用SEB和OVA共同作用于BALB/c小鼠，分离过敏小鼠脾脏CD4+T细胞，和DC在不同条件下共同培养，检测细胞上清液中Th1/Th2细胞因子的水平。探讨在微生物产物参与的食物过敏( food allergy, FA)中TIM4对CD4+T细胞分化的影响。　　 方法:　　 培养BALB/c小鼠骨髓来源的树突状细胞(bone marrow-derived DC，BMDC)，培养的DC分为两组：金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)刺激组和空白对照组。使用SEB和OVA致敏BALB/c小鼠，取过敏模型小鼠脾脏CD4+T细胞，和DC细胞共同培养分为5组：空白对照组、SEB+卵清蛋白(OVA)共同作用组、SEB组、OVA组及TIM4抗体干预组。进行相关指标的检测。　　 1．RT-PCR检测DC的TIM4mRNA表达。　　 2．流式细胞仪检测DC表面CD11c、MHC-Ⅱ、CD86的表达。　　 3．ELISA法测定混合培养细胞上清液IL-4与IFN-γ的表达。　　 所得数据均采用SPSS13.0统计软件包进行分析。组间均值比较采用单因素方差分析，以α=0.05为假设检验标准。　　 结果:　　 1．体外分离骨髓细胞，诱导分化为树突状细胞，通过流式细胞仪检测特征性标志CD11c纯度可达70％，并具有特征性形态。　　 2．使用SEB刺激DC，与空白对照组相比，SEB刺激组DC TIM4 mRNA表达明显增高（0.941±0.018 vs0.422±0.083，均P＜0.05），并具有剂量依从性。　　 3．使用SEB刺激DC，流式细胞仪检测：SEB刺激组DC表面分子MHC-Ⅱ、CD86表达明显高于空白对照组(MHC-Ⅱ:76.684％±3.1803％vs52.984％±3.6026％,P=0.000;CD86:89.746％±2.113％vs67.558％±0.4341％,P=0.000)。　　 4．DC和CD4+T细胞共同培养中，相比对照组，SEB+OVA组IL-4表达显著增高(295.834±20.408vs78.335±13.109，均P＜0.05)，而IFN-γ的表达明显减少（362.109±92.271vs761.897±102.967，均P＜0.05）；SEB组或OVA组IL-4和IFN-γ与空白对照组无明显差异：DC和CD4+T细胞共同培养中应用TIM4抗体干预后，结果显示对比SEB+OVA组IL-4明显降低，而IFN-γ的表达明显增高(P均＜0.05)，与对照组、SEB组和OVA组相比两种细胞因子的表达无统计学差异。　　 结论:　　 1．SEB刺激DC增加TIM4的表达。　　 2．SEB刺激DC促进DC上MHC-Ⅱ和共刺激分子CD86表达上调，促进DC功能成熟。　　 3．SEB和OVA共同刺激促进CD4+T细胞分化为Th2细胞，共同导致食物过敏。单一的SEB或者OVA不能引起食物过敏反应。　　 4．TIM4抗体干预抑制Th2细胞分化，有效纠正Th1/Th2细胞失衡，治疗食物过敏，显示TIM4在食物过敏反应中起重要作用。