【摘 要】
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目的:明确脓毒血症时胸主动脉一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）的表达对细胞间黏附分子-1（Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）的影响并探究其可能的潜在机制。方法:对6-8周的雄性c57小鼠行盲肠结扎穿孔术（Cecal ligation and puncture,CLP）进行造模,随机分为:（1）
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目的:明确脓毒血症时胸主动脉一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）的表达对细胞间黏附分子-1（Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）的影响并探究其可能的潜在机制。方法:对6-8周的雄性c57小鼠行盲肠结扎穿孔术（Cecal ligation and puncture,CLP）进行造模,随机分为:（1）对照组（Control）;（2）对照组+L-NAME组（Control+L-NAME,NOS抑制剂）;（3）CLP组;（4）CLP+L-NAME组（n≥4）。术后24h收集胸主动脉和肠系膜动脉用Western blot检测eNOS的表达;收集不同时间的胸主动脉进行免疫组化、免疫荧光、髓过氧化物酶（MPO）染色以及Western blot和RT-qPCR检测eNOS、ICAM-1的变化。分离并培养牛主动脉内皮细胞（Bovine aortic endothelial cells,BAECs）,给予浓度梯度和时间梯度的脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）处理,检测eNOS和ICAM-1表达量的变化;L-NAME（1m M）预处理BAECs后用合适浓度的LPS刺激,采用Western blot、RT-qPCR检测eNOS和ICAM-1的变化,同时检测细胞培养基中NO的浓度。结果:（1）CLP术后24 h肠系膜动脉eNOS表达减少,而胸主动脉eNOS表达增加,同时胸主动脉eNOS和ICAM-1的表达呈时间依赖性增加。（2）在CLP术前给予L-NAME（100 mg/kg）抑制eNOS,可显著增加CLP诱导的胸主动脉ICAM-1的表达,而对照组直接注射L-NAME,ICAM-1表达无明显变化;免疫组化、免疫荧光及MPO染色予以支持上述结果。（3）体外实验发现LPS刺激在短时间内（4h内）增加了BAECs中eNOS的表达,而ICAM-1的表达呈现时间依赖性上升。（4）L-NAME抑制eNOS后,LPS诱导的BAECs中ICAM-1的表达显著上升。结论:脓毒血症时胸主动脉eNOS和ICAM-1的表达呈时间依赖性增加,eNOS增多可抑制ICAM-1的表达,提示eNOS可能参与改善胸主动脉血管高粘附状态。
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