来氟米特对LPS诱导下HaCaT细胞增殖及对分泌IL-8、ICAM-1的影响

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目的:观察来氟米特活性代谢产物A771726对脂多糖(LPS)诱导下HaCaT细胞增殖和分泌功能的影响,探讨来氟米特治疗银屑病的作用机制。方法:将HaCaT细胞分为空白组、LPS组、LPS+A771726组。(1)MTT法检测细胞增殖水平的变化;(2)流式细胞仪检测细胞凋亡;(3)倒置相差显微镜观察细胞形态变化,PI染色荧光显微镜观察细胞凋亡;(4)ELISA法检测细胞上清液中IL-8、ICAM-1的含量变化。结果:(1)A771726对LPS诱导下HaCaT细胞的增殖有明显的抑制作用,且抑制作用随浓度的增加而增加,具有浓度依赖性,在48h抑制作用最强,72h时到达平台期;(2)A771726作用48h后,细胞凋亡率随浓度的增加而增加。(3)倒置显微镜下观察,LPS组细胞呈致密单层,随着A771726浓度升高,细胞体积变小、细胞间隙变大,细胞密度减少,漂浮细胞增多。荧光显微镜下观察,随药物浓度增高,凋亡细胞数量增多。(4)LPS可以诱导HaCaT细胞高分泌IL-8和ICAM-1, A771726可以抑制LPS诱导下HaCaT细胞分泌IL-8和ICAM-1,抑制作用随浓度增加而增加。结论:来氟米特可以抑制LPS诱导下HaCaT细胞增殖、促进其凋亡,并抑制其分泌IL-8、ICAM-1,这可能是来氟米特治疗银屑病的作用机制之一。
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