目的:　　1.探讨SDS-PAGE检测尿蛋及评估肾损伤的临床价值，试图发现不同类型肾损伤的特异性蛋白条带；　　2.寻找富集和浓缩尿蛋白成分效果较好的样品处理方法，运用MALDI-TOF MS技术检测尿蛋白，试图发现糖尿病、高血压肾损伤的特异性生物标志物。　　方法:　　1.对单纯糖尿病患者49例，糖尿病合并高血压患者42例，单纯高血压患者48例，其他不同类型的肾病患者57例，以及34例健康对照者的尿液进行SDS-PAGE检测，同时检测尿微量白蛋白（MAU）、血肌酐（SCr）以及尿素氮（BUN），并对数据进行统计学分析；　　2．从病例组挑选不同种类SDS-PAGE蛋白条带的样本，分别用:①浓度为100%和90%的丙酮沉淀，随后用不同浓度甲酸加Tris-HCl缓冲体系重溶，最后通过SDS-PAGE和MALDI-TOF MS检测判断富集效果；②7ul、14ul、21ul的磁珠对样本进行处理，随后通过SDS-PAGE和MALDI-TOF MS检测判断磁珠对尿蛋白的吸附效果；③进行HPLC分离，旋干，进行MALDI-TOF MS检测；最后，结合SDS-PAGE和MALDI-TOF MS检测结果对以上三种方法进行综合比较分析。　　结果:　　1.通过SDS-PAGE检测，根据蛋白质分子量大小将蛋白尿分为生理性蛋白尿组、病理性蛋白尿组以及未检出蛋白组，病理性蛋白尿组包括混合14kD组，混合27kD组，肾小管性蛋白尿，肾小球性蛋白尿；病理性蛋白尿中，单纯糖尿病组以肾小管性蛋白尿居多（约占22.4%），单纯高血压组也以肾小管性蛋白尿为主（约占27.1%），糖尿病合并高血压组以混合14kD组蛋白尿为主（约占31.0%），IgA肾病组以混合14kD组居多（占36.4%），狼疮性肾炎组以混合14kD组为主（占35.7%），原发性肾病综合征（PNS）组以肾小球性蛋白尿为主，占33.3%，健康对照组仅有4例在66kDa处有条带，且条带淡染，其余未检出任何条带；并对各组尿微量白蛋白（MAU），血肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）进行统计学分析，混合14kD组与27kD组MAU差异无统计学意义，与其他各组比较差异均有统计学意义；混合14kD组SCr和BUN与其他各组比较，差异均有统计学意义；　　2.①SDS-PAGE结果显示，经浓度为90%和100%的丙酮沉淀后的样本，与原始样本相比，检出的蛋白条带数量多，且颜色明显加深；90%和100%丙酮沉淀后的SDS-PAGE图相比，90%检出的蛋白条带颜色较100%的更深；加有甲酸的样本，蛋白条带颜色变浅，甚至数量减少；MALDI-TOF MS检测，90%丙酮处理后的样本较100%，检出的质谱峰，数量多且丰度高；②磁珠处理的样本，7ul上清液SDS-PAGE蛋白条带颜色均较14ul和21ul深，MALDI-TOF MS检出的质谱峰丰度高，而洗脱液和14ul和21ul相比，SDS-PAGE蛋白条带颜色较浅，MALDI-TOF MS检测质谱峰丰度明显很低，而14ul和21ul几乎无差异；③尿蛋白阴性或1+的样本磁珠处理后MALDI-TOF MS检测到的质谱峰丰度较效果丙酮沉淀法低，但尿蛋白2+的样本，磁珠处理后MALDI-TOF MS检测到的质谱峰较丙酮沉淀法数量多，且丰度高；④病例组HPLC分离出较多的峰，且分段收集旋干后MALDI-TOF MS检测出较多的质谱峰，并在病例组中发现质荷比（M/Z）在8770Da、10061Da、14000Da、19000Da附近出现的峰频率较高。　　结论:　　1.单纯糖尿病、单纯高血压患者早期肾损伤以肾小管损伤为主，糖尿病合并高血压患者、IgA肾病、狼疮性肾炎（LN）患者肾脏损伤均同时累及肾小管和肾小球，原发性肾病综合征（PNS）患者以肾小球损伤为主；SDS-PAGE与SCr、BUN检测结果具有一致性，但比MAU、SCr、BUN能够更早更全面地反映肾损伤程度及部位，对判断糖尿病、高血压以及各种类型的肾损伤具有重要的临床价值。　　2.丙酮沉淀法对大分子、白蛋白以及小分子蛋白均具有较好的富集效果，且90%的丙酮沉淀蛋白的效果优于100%；磁珠法对尿液蛋白成分具有吸附作用，但吸附能力有限；高效液相色谱（HPLC）相比丙酮沉淀法和磁珠法能检测出较多的质谱峰，但操作繁琐，费时，对实验室的仪器设备要求较高。综合考虑，丙酮沉淀是相对较好的富集蛋白的方法。