一种固定化微生物水解酶的GMA系载体的合成及应用

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本文以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)和双甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)悬浮聚合制备亲水性大孔固定化酶载体(GE)。利用析因设计考察了交联度、混和致孔剂用量(乙酸丁酯和异辛醇)、致孔剂配比对载体孔结构的影响。析因设计研究结果表明,交联度、致孔剂的用量和致孔剂的配比三个因子是影响共聚产物性能的主要因素,致孔剂用量与致孔剂配比的交互作用对性能也有较大的影响。通过析因试验设计指导合成,得到最优化的载体合成配方:交联度为65﹪、致孔剂用量104.3﹪、致孔剂配比为62.7﹪(乙酸丁酯:异辛醇=62.7∶37.3)。得到的载体的各项性能指标为:比表面积(SpecificSurfaceArea)114.94m2/g,孔容0.501cc/g,平均孔径15.4nm,环氧基含量为696μmol/g干树脂,载体对牛血清白蛋白(BSA)的吸附量从最初的2.01mg/g湿树脂增加到4.06mg/g湿树脂。选用一种GE载体用于固定微生物水解酶沙门氏菌产胞外脂肪酶(S.marcescensexolipase),确定固定化的最适宜的条件是30℃下在pH8.0吸附5小时。用于拆分手性底物的实验,发现5批反应中ees(底物对映体过量值)均高于97﹪,E值约为100。30℃条件下反应,该固定化酶半衰期为238小时。
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