合浦珠母贝QM同源基因的分离,表达及其功能研究

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本研究以合浦珠母贝(Pinctada fucata)外套膜为研究对象,在已经构建了合浦珠母贝外套膜cDNA文库的基础上,根据己知的生物物种中QM蛋白的同源序列设计并合成简并引物,通过RT-PCR的方法首次从软体动物中筛选到QM同源基因。借助计算机软件比较基因序列和氨基酸序列,发现QM基因编码的氨基酸序列非常保守。组织表达水平结果显示,该基因在被测多种组织中均有表达,但在消化腺和外套膜中的表达水平最高。为进一步研究QM的功能,在体外表达了QM基因并运用金属螯合层析获得了纯化的QM蛋白。体外实验研究了QM与Zn<2+>结合后构象的变化,以及QM对成骨细胞生长分化的影响,结果表明合浦珠母贝QM是含有与Zn<2+>结合基序的转录因子并具有促成骨活性。本研究初步证明了合浦珠母贝外套膜中有参与蛋白合成的调控因子存在和具有成骨活性的蛋白存在,为珍珠质用于骨移植替代材料奠定理论基础,为我国海洋生物资源一合浦珠母贝的合理开发利用提供科学依据。
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