背景与目的：妊娠期高血压疾病是妊娠期特有的疾病,以妊娠20周后高血压、蛋白尿、水肿为特征,并伴有全身多脏器的损害。该病严重影响母婴健康,是孕产妇和围生儿发病及死亡的主要原因之一。妊娠期高血压疾病在我国发病率为9.4%,国外报导7%-12%,目前认为其发病起源于胎盘病理生理改变,进一步由高血压状态导致全身血管内皮细胞损伤,引起脑、心、肺、肝、肾等重要脏器严重缺血,其中肾脏损害是其早期发病特征,而肾脏损害机制的研究国内外文献报告甚少。肾脏特征性损害主要表现为肾小球毛细血管壁和基底膜的增生及蛋白尿的产生。发生机制尚不清楚,近年来研究发现细胞外基质(ECM)合成和降解失衡是各种原发性肾病或者继发性肾病发生、发展的重要原因。基质金属蛋白酶9(MMP-9)和乙酰肝素酶(HPA)作为ECM的降解酶,其表达变化可能是妊娠期高血压疾病肾脏损害的重要原因。临床上无特效治疗妊娠期高血压疾病肾脏损害的药物,有使用肝素治疗的经验,但由于肝素易导致出血,故临床未推广使用,低分子量肝素(LMWH)是从普通肝素中提取出来的,具有出血副作用少、生物利用度高等特点,其生物学作用主要为抗凝、扩张血管、降低血压、减少肾小球基底膜细胞的增殖等。本实验通过制备妊娠高血压疾病动物模型并用LMWH进行干预治疗,观察MMP-9和HPA在妊娠期高血压疾病大鼠肾脏组织中的表达变化及LMWH的预防和治疗作用,并探讨妊娠期高血压疾病肾脏损害机制。材料与方法：(1)妊娠期高血压疾病动物模型的制备与分组：取正常Wistar雌性大鼠45只,按雌雄2：1合笼,每日清晨取雌鼠阴道分泌物涂片,发现精子计为妊娠第1d。将妊娠鼠随机分为3组,正常妊娠组、妊娠期高血压疾病组和LMWH干预组各15只,将妊娠期高血压疾病组孕鼠于妊娠第14天开始皮下注射亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME) 250 mg/kg, LMWH干预组孕鼠于妊娠第14天开始皮下注射L-NAME250 mg/kg,于妊娠第16天开始皮下注射L-NAME250 mg/kg(上午)、LMWH 600IU/kg(下午),正常妊娠组孕鼠注射等量的生理盐水,每日一次。另取15只未交配健康孕龄期雌鼠为非孕对照组。四组均于妊娠第12天起每日测量大鼠尾动脉血压,隔日收集24小时尿量以测定尿蛋白。(2)标本采集：于妊娠第21天在20%乌拉坦(5ml/kg)麻醉下,取双肾部分置于10%中性福尔马林浸泡固定,待用HE染色和免疫组织化学染色。收集24小时尿量,采用磺柳酸-硫酸钠比浊法,以牛血清白蛋白为标准蛋白测尿蛋白。(3)免疫组织化学方法：肾脏组织中MMP-9和HPA的表达用免疫组织化学测定,步骤按照试剂盒说明操作。(4)统计学分析：采用SPSS13.0统计软件处理,数据表示为均数±标准差(x±s),两组间均数的比较用t检验,相关性分析用Spearman等级相关,显著性水准α=0.05。结果：1.实验室检查结果：妊娠期高血压疾病组大鼠平均动脉压、尿蛋白于用药第二天开始升高,结束分娩时较正常妊娠组和非孕对照组明显升高。LMWH干预组平均动脉压、尿蛋白较妊娠期高血压疾病组明显降低,但仍未达到正常妊娠水平。2.肾脏组织病理学变化：妊娠期高血压疾病组大鼠肾脏组织HE染色显示肾小球部分系膜细胞和基底膜细胞增生,系膜基质增多,肾小球动脉壁玻璃样变性。LMWH干预组大鼠肾脏组织肾小球系膜细胞和基底膜细胞增生减轻。3.肾脏组织MMP-9和HPA表达变化：在非孕对照组,MMP-9和HPA在肾小球几乎无表达,仅在肾小管有轻微表达；在正常妊娠组,MMP-9和HPA在肾小球的表达较对照组增强；在妊娠期高血压疾病组中,MMP-9和HPA在肾小球的表达较正常妊娠组明显增强；在LMWH干预组,MMP-9和HPA在肾小球的表达较妊娠期高血压疾病组明显减弱,但仍未达到正常妊娠水平。4.妊娠期高血压疾病组大鼠MMP-9和HPA在肾小球的表达成相关关系,两者成正相关。结论：1.妊娠期高血压疾病组大鼠肾脏组织中MMP-9和HPA的表达明显高于正常妊娠组和非孕对照组。肾脏组织中MMP-9和HPA的表达增强可能是妊娠期高血压疾病肾脏损害的机制之一。2.MMP-9和HPA在肾脏组织中的表达呈正相关,提示HPA可能促进MMP-9的表达,并可能与MMP-9共同发挥作用,促进妊娠期高血压疾病肾脏损害。3.LMWH干预组大鼠肾脏组织中MMP-9和HPA的表达较妊娠期高血压疾病组减少。LMWH对妊娠期高血压疾病肾脏损害具有保护作用。