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本论文研究工作是采集浙江省南麂岛近海的沉积物,采用平板涂布法在实验室内进行放线菌菌株的分离,利用琼脂块法和挖孔法抑菌筛选模型结合筛选出对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(V.harveyi)两种大黄鱼病原性弧菌具有不同拮抗作用的海洋放线菌,并对具有较强抑菌活性的NJR0956菌株的分类地位及其活性产物的基本性质进行了研究。实验结果如下:
(1)从南麂岛海域沉积物中共分得海洋放线菌86株,筛选出对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(V.harveyi)两种大黄鱼病原性弧菌具有不同拮抗作用的海洋放线菌5株,其中编号NJR0956的菌株对两种致病菌的抑菌圈直径均>25mm,表现出较强的抑制作用;进而测定了5株活性菌株的抗菌谱,结果表明它们对指示菌中的副溶血弧菌、哈维氏弧菌、鳗弧菌(V.anguillarum)、溶藻弧菌(V.anguillarum)四种病原弧菌均具有较好的拮抗作用;在对菌株NJR0956的抑菌效果研究中发现,该菌株在牛肉膏蛋白胨液体培养基中不仅能够增殖,而且能够有效地抑制病原菌的生长。
(2)菌株NJR0956具有较强的抗大黄鱼主要病原性弧菌的活性,故结合该菌株的形态特征、培养特征、生理生化特征、16S rDNA及其系统发育分析对其分类进行鉴定,初步鉴定菌株NJR0956为链霉菌,NJR0956与Streptomycesdiastaticus subsp.ardesiacus相似性为99.52%,在发育树上聚为同一分支,亲缘关系最近。
(3)对菌株NJR0956所产抗菌活性物质理化性质进行了初步探讨,研究表明菌株NJR0956具有良好的传代稳定性,所产的抗菌活性物质均具有较强的光稳定性和热稳定性,该菌株发酵液的抑菌活性在酸性和中性条件下稳定。菌株NJR0956所产的活性物质为易溶于氯仿的中等极性抗生素。