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枸杞子是茄科植物枸杞的成熟果实,是我国重要的药食兼用植物资源之一。其生物活性物质枸杞多糖(LBP)已被现代科学研究证实具有多种药理作用和生理功能,引起人们广泛关注。本文从枸杞多糖的提取入手,研究了枸杞多糖的提取、分离纯化工艺条件,并对体外抗氧化活性进行了初步探讨,以期为综合开发利用枸杞资源提供参考。
试验选用热水浸提法和超声波辅助提取法对枸杞多糖进行提取,并对提取工艺进行了优化。确定了热水浸提法最优的工艺条件:料液比1:15.29,浸提温度83.80℃,浸提时间2.17h,最佳的浸提次数为2次。超声波辅助提取的最优工艺条件为:超声时间30min,超声功率300W,料液比1:10。
通过对不同截留分子量超滤膜的比较分析,最终选择截留分子量为UF1、UF3的超滤膜作为实验用膜。根据单因素实验结果,确定了最优的膜分离条件。微滤处理最优工艺条件为:操作压力0.20Mpa~0.22Mpa、操作温度50℃、原料液多糖浓度0.72g/L;超滤处理最优工艺条件为:UF1、UF3最适操作压力均为0.65Mpa,UF1操作温度35℃、UF3操作温度45℃,此时膜分离效果最好。微滤和超滤处理分别进行约20min和25min后膜通量趋于稳定,此工艺条件可为工业化生产提供理论依据。
将膜分离制得的枸杞粗多糖经DEAE-52和SephadexG-100进一步分离纯化后得到组分LBP1和LBP3-A,经HPLC测定分子量,组分LBP1的平均分子量大小为63.7KDa,组分LBP3-A平均分子量大小为44.8KDa。通过对还原力和清除自由基能力的测定结果表明LBP、LBP1和LBP3-A均有一定的还原力和清除自由基的能力,但均小于Vc。