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背景和目的：BCR-ABL蛋白具有持续活化、不受机体调控的酪氨酸激酶活性，与CML的发病机制密切相关,是CML治疗的重要分子靶点[1-2]。伊马替尼（Imatinib，IM，格列卫，STI571）是最具代表性的以BCR-ABL酪氨酸激酶为靶点的抗癌药物，在CML治疗上取得了巨大成功。但治疗后易复发【3】。IM耐药性的出现使得开发新的BCR-ABL酪氨酸激酶抑制剂迫在眉睫。姜黄素(Curcumin，Cur)有显著的体内外抗癌活性，可诱导BCR-ABL表达阳性的CML细胞凋亡，对CML可能有特殊的治疗意义[4]。然而，Cur存在水溶性差，水溶液易水解，首过消除现象明显，生物利用度低等问题阻碍了其应用于肿瘤治疗[5]。C085是本实验室利用拼合原理合成的姜黄素衍生物，对其与BCR-ABL激酶的结合进行了计算机模拟，发现其在与BCR-ABL激酶的结合位点上与IM不同。在体外筛选时也发现其能明显抑制IM敏感及耐药的白血病细胞株的增殖，IC50只有其母体姜黄素的1/3甚至更低。在此基础上，本课题对C085作用于CML细胞的效应及其与ABL野生型及IM耐药点突变激酶的关系做进一步研究，以期能找到一种对IM耐药点突变激酶有效的酪氨酸激酶抑制剂。方法：1.MTT法和台盼蓝排染法观察C085对细胞增殖的影响2.AnnexinV-FITC／PI双荧光染色后流式细胞仪检测C085对细胞凋亡的影响。3.集落形成法观察C085对CML病人骨髓CD34~+细胞增殖的影响。4.应用激酶检测试剂盒检测C085对Abl激酶活性的影响5.蛋白免疫印迹（WesternBlot）探讨C085引发CML细胞凋亡的机制，检测其对BCR-ABL及其下游信号转导通路蛋白的表达及磷酸化及对其他凋亡相关蛋白表达的影响6.JC-1荧光染色法检测C085对细胞线粒体膜电位的影响结果：1.C085对K562细胞24h、48h和72h的IC50分别为2.82μM、2.46μM和2.3μM，对K562/G01细胞24h、48h和72h的IC50分别为6.15μM、5.11μM和3.74μM，抑制呈浓度依赖性。姜黄素对K562和K562/G01细胞48h的IC50分别为15.28μM和14.1μM，明显高于C085（P<0.05），即C085比其母体姜黄素能在更低浓度抑制CML细胞。台盼蓝排染实验结果表明，C085对K562/G01作用72h，可完全抑制细胞数目的增长，且呈浓度依赖性，而IM在低浓度时对K562/G01无明显杀伤作用，高浓度时的杀伤作用亦明显弱于C085。2.AnnexinV-FITC／PI双荧光染色后流式细胞术检测结果发现，C085在24h即对IM敏感和耐受的CML细胞均有较强的诱导凋亡作用，主要是中、晚期凋亡。与阳性对照药IM相比，诱导凋亡作用明显。3.镜下观察及集落数量统计发现，经过药物处理的CD34~+祖/干细胞集落随着C085药物浓度的增加，集落形成明显减少，呈浓度依赖性。C085及Cur均可对已经产生IM耐药的CD34~+祖/干细胞集落有明显的抑制作用。4.C085可抑制Abl野生型及IM耐药点突变激酶活性，且为非ATP竞争性抑制5.C085可下调BCR-ABL的自磷酸化和下游信号转导通路蛋白的表达和磷酸化水平，作用强于IM。C085在2.5μM时即对凋亡相关蛋白cleaved-PARP、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9具有非常明显的上调作用，对Bax、Bcl-2的作用也强于IM，具有明显的量效关系6.C085通过直接作用于线粒体的PT孔使其开放，激活凋亡相关蛋白，诱导细胞凋亡，促凋亡作用强于IM结论：C085可抑制BCR-ABL~+CML细胞的生长与其抑制BCR-ABL蛋白激酶活性，下调相关信号通路；直接作用于线粒体的PT孔使其开放，激活凋亡相关蛋白，诱导细胞凋亡有关。C085对IM敏感及耐药的白血病细胞均有杀伤作用，有望克服IM的耐药而成为新的TKI