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目的IgA肾病(IgA nephropathy)是我国原发性肾小球肾炎最常见的类型,在确诊后5年～25年内约20%～40%的患者逐渐发展为终末期肾病(ESRD)。IgAN的预后不仅与肾小球硬化、肾功能损伤、高血压、尿蛋白排泄量有关,还与肾间质纤维化关系密切。肾小管管周毛细血管网(peritubular capillaries,PTCs)丢失直接影响到肾间质供血供氧及营养物质的供应,进而引起或加重肾间质纤维化。血小板反应蛋白(thrombospondin-1,TSP-1)是一种细胞外基质糖蛋白,可以通过与CD36结合、抑制细胞生存基因Bcl-2表达、增加调亡基因Bax表达、激活P59fyn/caspase-3/P38MAPK等途径诱导内皮细胞凋亡、抑制新生血管形成。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是内皮细胞的高度特异性有丝分裂原。本文通过观察IgA肾病肾组织TSP-1蛋白及TSP-1mRNA、VEGF表达及PTCs的改变,探讨血管源性因子表达失衡在IgA肾病PTCs变化及肾间质纤维化中的作用。方法选择2005.12-2006.7在河北医大二院肾内科住院、经临床与肾活检诊断为原发性IgA肾病患者54例(其中男性28例,女性26例,年龄13-60岁,32.31±12.65岁),除外狼疮性肾炎、过敏性紫癜性肾炎、乙肝相关性肾炎、肝硬化、肿瘤等继发性IgA肾病,活检前均未用过糖皮质激素、免疫抑制剂、低分子肝素钠等治疗。详细收集患者临床(包括血压、血脂、血浆白蛋白、血清IgA、24小时尿蛋白定量、尿渗透压、血肌酐等)和病理资料。肾小管间质病变程度用Katafuchi法分为Ⅰ(9例)、Ⅱ(17例)、Ⅲ(15例)、Ⅳ(13例)4级病变组;10例肾小球轻微病变患者做对照组。应用原位杂交法检测TSP-1 mRNA的表达;免疫组化PV法检测TSP-1、VEGF、Ⅲ型胶原、CD34蛋白的表达。在200倍视野下计数肾间质中CD34阳性的完整毛细血管腔个数,取平均值作为该切片的肾小管周围毛细血管指数(PCI)。在北航IMS-2000图像分析系统下进行图像分析。结果①肾间质PTCs随病变程度加重而减少以CD34标记毛细血管内皮细胞,观察管周毛细血管情况,其在对照组、Ⅰ、Ⅱ级病变组血管扩张较好,管腔光滑均匀。PCI在照组、Ⅰ及Ⅱ级病变组三组的组间差异无统计学意义(27.0±1.88～22.9±3.89,P=0.328～0.311);而至Ⅲ、Ⅳ级病变组肾间质管周毛细血管管腔逐渐萎缩,PCI比Ⅰ、Ⅱ级病变组明显减少(22.9±3.89～14.56±2.28 ,P均<0.05)。②肾组织中TSP-1蛋白及TSP-1 mRNA的表达变化TSP-1蛋白及TSP-1 mRNA在对照组及I级病变组肾组织中无或仅有极少量表达。随着肾组织病变及纤维化程度加重,表达量渐增加(Ⅰ～IV级病变各组间差异有统计学意义,TSP-1蛋白从13.11±1.50%增至33.97±9.18%,P<0.01;TSP-1mRNA从17.64±1.21%增至37.03±9.63%,P<0.05)。主要表达在部分肾小管上皮细胞胞浆,肾小球无表达。③VEGF及Ⅲ型胶原表达及肾小球硬化率VEGF在肾小球可见少量表达,主要在肾小管上皮细胞胞浆表达。对照组与I级病变组织表达差异无统计学意义(P=0.396)。与Ⅰ级病变组相比,Ⅱ级、Ⅲ级病变组VEGF表达增加(从21.48±7.54%增至40.20±5.47%,P均<0.05);至IV级病变时则表达减少,与Ⅲ级病变组织有统计学差异(从40.20±5.47%减至19.53±5.45%,P<0.01)。Ⅲ型胶原主要在肾小球及间质的纤维结缔组织表达,随着IgA肾病病变程度的加重,其在肾间质表达面积进行性增加,Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、IV级病变组表达各组间差异有统计学意义(从16.63±4.72%增至36.85±4.63%,P<0.01)。肾小球硬化率随病变加重逐渐增加(从0.43±1.00%增至48.52±32.61%),各组间差异有统计学意义(P<0.01)。其与间质纤维化程度平行,与Ⅲ型胶原成正相关(r=0.546,P<0.01)。④TSP-1、TSP-1 mRNA与各观察指标的相关性分析TSP-1蛋白及TSP-1 mRNA均与Ⅲ型胶原正相关(r=0.671、0.655,P均<0.05),两者与PCI负相关(r=-0.644、-0.564,P均<0.05)。TSP-1蛋白及TSP-1 mRNA与VEGF相关性无统计学意义(r=-0.324、-0.375,P=0.28～0.14)。TSP-1蛋白及TSP-1 mRNA与肾小球硬化率、24小时尿蛋白定量正相关(r=0.629、0.631,P<0.01),而与性别、年龄、血清补体C3、血清IgA、白蛋白、血脂、尿渗透压、血压、病程等无相关性(P均>0.05)。结论IgA肾病间质纤维化程度与PTCs的减少密切相关。促血管新生因子表达的减少及抑血管新生因子表达的增加可导致IgA肾病间质肾小管周毛细血管网减少,促进肾间质纤维化及疾病的进展。