【摘 要】
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1. 5龄期家蚕丝腺表达谱的分析幼虫期的家蚕丝腺的基因的调控,尤其是在转录水平上,一直被认为是研究真核生物基因调控的最佳模型之一。本论文通过收集目前公共数据库的表达序列
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1. 5龄期家蚕丝腺表达谱的分析幼虫期的家蚕丝腺的基因的调控,尤其是在转录水平上,一直被认为是研究真核生物基因调控的最佳模型之一。本论文通过收集目前公共数据库的表达序列标签,cDNA和蛋白的表达数据,对家蚕不同组织和不同发育阶段的表达信息系统的分析,鉴定出一些在丝腺特异表达的基因;同时对家蚕中部丝腺和后部丝腺的数据进行差异比较,初步阐明丝腺不同部位为了分泌丝胶蛋白和丝心蛋白等不同蚕丝纤维蛋白组分而功能特化的需要。再综合之前的分子克隆和杂交等方面实验数据积累,全面描绘5龄期家蚕丝腺的表达谱系,将表达的基因按照其体内的功能途径分组,并且预测可能表达的与之相互作用分子,最后设计实验予以证实。这将为下一步的研究丝腺高效而又特异表达蚕丝纤维基因机制及蛋白合成机理提供参考。
2.家蚕丝心蛋白重链的N端结构域的表达研究家蚕丝心蛋白重链是蚕丝纤维的主要成分,其特异的结构与功能决定了蚕丝的包装和分泌的方式,是当前家蚕蚕丝高效合成和分泌机理的研究中的关键问题。本论文通过设计克隆了丝心蛋白重链单独折叠的N端结构域,绕过其编码序列中典型纤维蛋白样的高度重复区域,尝试使其在大肠杆菌中表达。获得了包含目的重组蛋白的包涵体,同时也为下一步深入的研究提供了参考。
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