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MiRNAs是一类可以负性调控基因表达的小的非编码RNA。越来越多的研究表明,一些miRNAs在肿瘤发生中起到类似肿瘤抑癌基因的作用,而这一作用与肿瘤中表观遗传学机制异常有密切的关系。为了在肝细胞癌中寻找和鉴定具有类似功能的miRNAs,我们首先联合应用两种抗肿瘤药物5-氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2deoxycytidine,DAC)和曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)分别处理八个肝细胞癌细胞株:YY8103, HepG2, MHCC97-H, MHCC97-L, Hep3B, Huh7, SK-hep-1和FOCUS,分析了处理前后人类723个miRNAs的表达变化。结果发现,19号染色体上的一个最大的miRNA cluster(C19MC)的表达水平在部分细胞株中明显升高。该区域位于19q13.41,包含43个miRNA,通过对43个miRNA的细胞活力筛选试验表明,过表达miR-517a和miR-517c可以抑制部分肝癌细胞的生长和增殖,使细胞周期停滞在G2/M期。另一方面,MiR-517a和MiR-517c的表达下调可以促进HepG2,MHCC97-H,MHCC97-L细胞的贴壁非依赖性软琼脂克隆形成能力。我们还应用荧光素酶报告基因实验验证了生物信息学方法对miR-517a和miR-517c靶基因的分析,结果表明,Pyk2是miR-517a和miR-517c的一个直接作用调控的靶基因。结合miR-517a和miR-517c在肝细胞癌中的表达下调的情况,我们得出以下结论:下调miR-517a和miR-517c的表达水平可以促进肝癌细胞的生长,而这一过程可能是由Pyk2介导完成的。