前言 近年来,顺铂（CDDP）作为临床常用的广谱抗癌药物之一,大量应用于泌尿生殖系肿瘤、头颈部肿瘤、恶性淋巴瘤等恶性肿瘤的治疗。但由于顺铂是一种以浓度决定疗效的抗肿瘤药物,短时间内给药浓度越高疗效越好,而由此引发的毒性作用亦越大,其中耳毒性为较严重的副作用之一。研究人员从不同的方面探索,研究顺铂毒性的机制以寻求更为有效的防护措施。本文通过对耳蜗基底膜进行体外培养,观察细胞保护剂阿米福汀（Amifostine）对于顺铂作用下耳蜗毛细胞和凋亡蛋白Fas的影响,来验证阿米福汀对顺铂所致细胞损伤、凋亡的拮抗及防护作用,为减少肿瘤病人放/化疗过程中耳毒性提供一个理论依据。 实验材料和方法 1.实验材料: 1.1 标本:选取生后3-5天左右的Wistar大鼠。 1.2 体外培养相关试剂 1.3 荧光染色相关试剂 2.实验方法:耳蜗器官体外培养法、免疫组织化学法 2.1 取材及培养:在解剖实体显微镜下分离取出全耳蜗基底膜,螺旋平铺于预先制备的15ul胶原凝胶上,加入1ml改良的体外培养基,移入CO₂培养箱（37℃,5%CO₂）中孵育24小时,次日更换培养基再培养24小时后,10%福尔马林缓冲液4℃固定过夜,PBS冲洗,浸入TRITC-phaloidine中避光染色30分钟,再次PBS冲洗,甘油铺片,40X正置荧光显微镜下观察并进行计数。