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目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默HMGB1基因对宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法构建靶向抑制HMGB1的siRNA表达载体(shRNA),瞬时转染转染HeLa细胞,筛选有明显干扰效应的两组质粒PGCsi3.0-1、PGCsi3.0-3组作为实验组,并设立阴性对照组(PGCsi3.0-Neg组)。采用RT-PCR技术、Western blot及细胞免疫组化技术分别对转染后24h、48h、72h HeLa细胞中HMGB1mRNA及蛋白的表达变化进行研究。MTT法、台盼兰实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期。结果通过预试验确定了构建的2种重组质粒PGCsi3.0-1组和PGCsi3.0-3组均能抑制HMGB1基因的表达。应用westen-blot方法检测Hela细胞中HMGB1蛋白表达,结果表明:转染重组质粒PGCsi3.0-1组和PGCsi3.0-3组的实验组HMGB1蛋白表达均明显低于阴性对照PGCsi3.0-Neg的表达;以转染后48h干扰效应最高,PGCsi3.0-1组、PGCsi3.0-3组蛋白抑制率分别为对照组56.52%、49.9%(p＜0.05)。RNA干扰后72h PGCsi3.0-1组、PGCsi3.0-3组蛋白抑制率分别为54.7%、40.89%,两组相比较无统计学差异(P＞0.05)。通过实时定量PCR检测到Hela细胞中HMGB1基因mRNA转录明显减少,抑制率分别为71.02%和56.11%;MTT法检测结果显示转染2种重组质粒PGCsi3.0-1组和PGCsi3.0-3组转染后的Hela细胞的增殖活性均明显下降;细胞周期结果显示转染PGCsi3.0-1组及PGCsi3.0-3组均能抑制Hela细胞周期由G2期进入S期,转染48h、72h后实验组G2期细胞中DNA含量均高于PGCsi3.0-Neg组及Hela细胞未转染组(p＜0.05);且S期细胞中DNA含量均低于空载体PGCsi3.0-Neg组及Hela细胞未转染组,差异均有统计学意义(p＜0.01)。结论重组质粒PGCsi3.0-1组和PGCsi3.0-3组均可下调Hela细胞内源HMGB1的表达,HMGB1基因的下调可抑制Hela细胞的增殖活性。研究结果为HMGB1介导的肿瘤基因沉默疗法提供良好的实验基础,特别是为宫颈癌的基因治疗带来了新思路。