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目的:
将米诺环素作为骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cell,BMSC)移植治疗大鼠实验性脊髓损伤的前期治疗和伴随治疗,来研究其是否可以为骨髓间充质干细胞移植发挥更好治疗作用创造有利的条件。
实验材料与方法:
一、实验材料
试验用细胞株:表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的SD大鼠骨髓间充质干细胞株(Cyagen赛业广州生物科技有限公司)。
实验动物:成年健康成熟SD雄性大鼠48只,体重200~250g,由中国医科大学实验动物中心提供。
盐酸米诺环素胶囊(惠氏公司)、NF-200小鼠抗大鼠单克隆抗体(武汉博士德)、SABC免疫组化试剂盒、DAB显色系统(武汉博士德)。
二、实验方法
将48只成年SD大鼠按Nystrom法造成重复性好的T10至T11节段脊髓急性损伤模型;随机分成四组:损伤组、米诺环素组、BMSC组及联合治疗组;将带有GFP基因的SD大鼠BMSC进行局部移植并将米诺环素经口给药辅助干细胞移植治疗。分别行BBB评分、HE染色、荧光显微镜细胞计数及免疫组化染色来判断不同治疗方法的疗效。
三、统计学分析
实验数据以均数加减标准差表示,采用SPSS16.0统计软件进行分析,两组间差异由t检验检测,多组间差异采用单方向方差分析,P<0.05有统计学差异。
实验结果:
在大鼠脊髓损伤2周后,联合治疗组BBB评分明显高于其它组,同时该组损伤脊髓在损伤中心可以观察到更多移植的干细胞,HE染色及免疫组化染色判断出联合治疗组损伤脊髓恢复情况最好。
结论:
口服米诺环素可以作为BMSC移植治疗脊髓损伤的前期治疗和伴随治疗。其可以在预防感染、促进损伤脊髓结构恢复以及增强BMSC迁移能力方面起到极其重要的作用。