【摘 要】
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近年来对拟南芥色氨酸合成途径的解析阐明了拟南芥色氨酸合成途径包括了分枝酸、吲哚甘油磷酸(IGP)和吲哚等一系列中间代谢物.为了鉴定色氨酸合成与非依赖色氨酸的IAA合成之
【出 处】
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中国科学院遗传学研究所 中国科学院遗传与发育生物学研究所
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近年来对拟南芥色氨酸合成途径的解析阐明了拟南芥色氨酸合成途径包括了分枝酸、吲哚甘油磷酸(IGP)和吲哚等一系列中间代谢物.为了鉴定色氨酸合成与非依赖色氨酸的IAA合成之间可能的分枝点,我们利用IGScDNA创制了转IGS反义RNA的拟南芥株系.在正常生长条件下,反义RNA株系αIGS1-1α、αIGS1-2表现出了一些类似IAA缺陷的表型,如莲座叶弱小、育性降低等.westernblot分析表明αIGS1-1与αIGS1-2的IGS表达受到了很大程度的抑制.为了准确测定植物样吕中的色氨酸含量,我们发展了应用高压液相色谱-毛细管区带电泳联用的方法,通过拟南芥色氨酸合成突变体trp3-1(色氨酸合酶α亚基突变)、trp2-1(色氨酸合酶β亚基突变)和转基因株系争氨酸与IAA含量的测定、分析,我们发现转基因株系与trp3-1、trp2-1之间色氨酸与IAA含量变化模式在IGP形成前后有着很大的差异.与拟南芥野生型相比,突变体与转基因株系色氨酸含量均有不同程度降低.这表明非依赖色氨酸的IAA合成了共享色氨酸合成途径中从分枝酸至IGP间些步骤.然而,总IAA水平在反义IGS转基因株系中的大大降低与在突变体trp3-1、trp2-1中的大大增加说明,非依赖色氨酸的IAA合成在吲哚形成之前业已从色氨酸合成途径中分枝出去.综上所述,可以得出结论:在拟南芥中,IG是非依赖色氨酸的IAA合成与色氨到合成的分枝点.
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