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胃癌是我国和日本最常见的恶性肿瘤，严重地威胁着人类的健康和生命，提高胃癌治愈率和生存率的关键在于早期诊断和早期采取适当有效治疗。胃癌的发生是多阶段多因素共同作用的结果，但迄今，有关胃癌发生的确切机制尚不清楚，近年的研究显示胃黏膜上皮细胞动力学异常参与胃癌的发生，正常胃黏膜的结构功能依赖于黏膜上皮细胞增殖和凋亡之间的动态平衡，而两者失衡会导致病变的产生，由于增殖细胞的基因组具有不稳定性，细胞增殖加快的同时也增加了DNA损伤和产生非整倍体的危险性，若损伤的DNA得不到及时的修复，就有可能逐渐由异型增生进展到癌肿。
众所周知，细胞增殖是在细胞内外信号的影响下，细胞周期的有序进展。在细胞增殖过程中，细胞外调控信号，如细胞因子、激素、神经递质等与细胞表面的相应受体结合后，通过细胞内信号途径，诱导一连串级联反应，实现对细胞周期的调控。已有研究表明，某些氨基酸类神经递质在体外具有刺激或抑制恶性肿瘤细胞增殖的作用。γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid，GABA)和谷氨酸(Glu)是哺乳动物大脑中重要的氨基酸类神经递质，GABA主要来源于三羧酸循环中的Glu，由谷氨酸脱羧酶(包括GAD65，GAD67)脱羧而成，与GABAA、GABAB(包括GABABR1和GABABR2)、GABAC受体结合后发挥作用。近年来的研究表明：GABA、Glu广泛存在于全身许多组织器官中，包括胃肠道。GABA除了作为胃肠神经递质，还有可能作为一种胃肠激素，协同Glu参与胃肠黏膜细胞分裂、分化、成熟的调节。
GABA与胃癌关系的研究是一个崭新的领域，国外有限的研究资料表明：人胃癌组织中，GABA含量增高，GAD活性增强，GABA及GABAB受体激动剂可抑制大鼠胃癌的生长。目前，GABA-Glu动态平衡系统与胃癌的关系及GADmRNA和GABABR在人胃癌的表达国内外未见报道。本课题旨在寻找一种可用于临床的测定人胃黏膜组织微量GABA和Glu的方法，并以此研究人胃癌组织、正常胃黏膜组织GABA和Glu含量差异，同时观察胃癌组织、正常胃黏膜组织GAD活性、GABABR表达的差异，以及GAD65mRNA和GAD67mRNA在人胃黏膜组织的表达，以阐明GABA-Glu动态平衡系统，GAD、GABABR表达异常与胃癌的关系。
研究一高效液相色谱法测定人胃黏膜中γ-氨基丁酸和谷氨酸含量γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid，GABA)和谷氨酸(Glu)是哺乳动物大脑中重要的氨基酸类神经递质，在胃黏膜组织含量极低。GABA除了作为胃肠神经递质，还有可能作为一种胃肠激素，协同Glu，参与胃肠黏膜细胞分裂、分化、成熟的调节，抑制胃癌的发生。随着GABA、Glu与胃癌关系研究的不断深入，要求建立一种快速、精确定量人胃黏膜组织GABA、Glu含量的方法。
GABA、Glu不具有紫外吸收，也不发射荧光，因此需将它们转变为能被检测的高灵敏度衍生化产物。本文用异硫氰酸苯酯(PITC)作衍生剂与胃黏膜组织中的氨基酸反应，衍生物经高效液相色谱法(HPLC)分离，色谱柱为Pico·Tag(R)氨基酸专用柱，梯度洗脱，后紫外检测，紫外检测波长254nm，建立了一种更简便、更灵敏的方法，适于检测胃黏膜组织的微量GABA、Glu。
研究结果表明：GABA在0.125～6.25nmol/mL范围，Glu在0.025～2.5μmol/mL范围，线性关系良好；GABA和Glu加样回收率分别为90.4～104％，88.1～105.5％；批内误差分别为3.56％，和1.12％；批间误差分别7.47％和5.98％。
本文采用PITC为柱前衍生剂，配合紫外检测仪，建立了一种高效、稳定、简便、快捷的HPLC梯度洗脱方法。该法条件简便、灵敏度高，分离周期短，适于检测胃黏膜组织中微量的GABA、Glu，应用前景广泛。
研究二人胃癌组织中γ-氨基丁酸、谷氨酸含量及谷氨酸脱羧酶、γ-氨基丁酸B型受体的表达γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid，GABA)是脊椎动物脑内一种重要的抑制性神经递质，主要来源于三羧酸循环中的谷氨酸(Glu)，通过谷氨酸脱羧酶(即GAD65，GAD67)脱羧生成，与GABAA、GABAB(包括GABABR1和GABABR2)、GABAC受体结合后发挥作用。近年来的研究表明，GABA可协同Glu，参与胃肠黏膜细胞分裂、分化、成熟的调节。本文探讨人胃癌γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)含量，谷氨酸脱羧酶(包括GAD65和GAD67)、GABAB受体(包括GABABR1和GABABR2)的表达。
随机选取30例胃癌手术标本，采用高效液相色谱法检测GABA和Glu含量，免疫组化法检测GAD活性、GABABR1和GABABR2的表达，RT-PCR法检测GAD65mRNA和GAD67mRNA的表达。这项研究中，我们首次对人胃癌组织、正常组织的GABA和Glu含量、GAD活性、GABABR1和GABABR2的表达坐了系统研究，同时还探讨了它们与不同胃癌临床病理特征，包括性别、部位、浸润程度、分化程度、TNM分期、淋巴结转移的关系。
研究结果显示：与正常胃粘膜组织比较，胃癌组织中GABA和Glu含量明显升高(p＜0.05)；GAD活性明显减弱(p＜0.05)；GABABR1和GABABR2阳性表达明显增加(p＜0.05)，但与胃癌的临床病理特征无明显相关。另外，人胃粘膜组织只有GAD67mRNA的表达，而无GAD65mRNA的表达。
对实验结果的研究表明：GABA、Glu含量，GAD、GABABR表达异常可能与胃癌的发生有密切关系，对胃癌诊断有一定辅助作用，但并不是判断胃癌预后的独立指标。人胃粘膜组织只有GAD67mRNA的表达，进一步证实GADmRNA在人外周组织分布的多样性。总之，GABA-Glu系统为进一步深入探讨胃癌癌变的机制开拓了一个新的研究视野，提供了新的理论依据。
小结1、本研究建立一项可靠、灵敏可同时测定人胃黏膜组织微量γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)含量的高效液相色谱法。
2、与正常胃粘膜组织比较，人胃癌组织中GABA和Glu含量明显升高；GAD活性明显减弱；GABABR1和GABABR2阳性表达明显增加。提示GABA、Glu含量，GAD、GABABR表达异常可能与胃癌的发生有密切关系，对胃癌诊断有一定辅助作用，
3、人胃癌组织GABA和Glu含量差异，GAD、GABABR的表达差异与不同胃癌临床病理特征无明显相关。提示GABA、Glu含量，GAD、GABABR表达异常并不是判断胃癌预后的独立指标。
4、人胃粘膜组织只有GAD67mRNA的表达，而无GAD65mRNA的表达。进一步证实GADmRNA在人外周组织分布的多样性。