心肌中收缩和调控蛋白的结构和功能研究

来源 :中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuqiang521
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该文从组成心肌收缩的动力蛋白--心肌肌球蛋白的一个分子一一心肌肌球蛋白轻链1入手,对心肌肌球蛋白轻链1的结构和功能在分子水平上做了研究,制备了人心肌肌球蛋白轻链1的单抗和多抗,初步建立了用于检测急性缺血性心肌梗死病人血清中心肌肌球蛋白轻链1含量的方法,最后对心肌中可能存在的抑癌因子进行了研究和探讨.心肌肌球蛋白是心肌收缩的动力蛋白.肌球蛋白轻链1是组成肌球蛋白的成分之一.该文第一章研究了人心室肌肌球蛋白轻链1的功能结构域.在大肠杆菌中表达了分别包含人心肌肌球蛋白轻链1(HVMLC1)1-98位和99-195位的N片断和C片断、包含1-41位和42-98位的NN部分和NC部分的GST融合蛋白.运用GST pull-down的方法,进行了LC1的各片断与肌球蛋白重链、G-肌动蛋白、F-肌动蛋白、心肌肌肉中的细丝的结合实验.另外将大鼠心肌肌球蛋白S1分别与HVMLC1全长、HVMLC1N片断和C片断进行重组,产生了包含了HVMLC1不同片断的重组肌球蛋白S1,并测定了不同重组体的ATPase活性.在发生急性缺血性心肌梗死时,人心室肌肌球蛋白轻链1会释放到血液中.该文第二章以大肠杆菌表达的人心室肌肌球蛋白轻链1为抗原制备了单克隆和多克隆抗体,建立了灵敏度达到放射免疫水平的ELISA检测方法,对大量正常人血清进行了检测,并将原核表达的抗原加入正常血清模拟心肌梗死病人血清,进行了检测.心脏中的原发性肿瘤的发生颇为罕见,在心脏中可能存在着某种抑制肿瘤发生的因子.在该文第三章,我们以猪心肌为材料,对心肌中是否存在抑癌因子进行了研究和探讨.我们得到了一组蛋白组分在体外可以抑制肿瘤细胞的生长,并对这个组分的组成用双向凝胶电泳进行了分析.这组蛋白组分中的一种或几种蛋白可能就是抑制肿瘤细胞生长的因子.上述研究一方面从分子水平对心肌肌球蛋白轻链1的结构和功能进行了研究,另一方面也从心脏疾病的角度探讨了心肌肌球蛋白轻链1在临床检测中的应用,同时对心脏这一有着重要功能的器官罕发肿瘤的原因进行了探讨.
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