流体剪切应力作用下力学信号在成骨细胞内的效应及分析

来源 :郑州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaolaoshi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的观察分析不同流体剪切应力作用下力学信号在成骨细胞内的生物学效应。方法1.细胞培养:成骨细胞在DMEM完全培养液中常规条件下培养,细胞生长接近融合成单层时,0.25%胰蛋白酶&0.02%EDTA常规消化,制成细胞悬液,倒置相差显微镜下细胞计数,以104/ml细胞密度接种已处理好的载玻片置于CO2孵箱(37℃,5%CO2,95%空气)继续培养,每两天换一次液。2.细胞成骨性能鉴定:(1)活体相差显微镜观察(2)碱性磷酸酶(ALP)染色(采用改良钙钴法)(3)骨钙素(BGP)免疫组化染色(即用型SABC法)(4)矿化结节染色(茜素红染色和von Kossa染色)3.细胞加力:运用定常流加载系统,在完全密闭无菌的情况下对细胞玻片进行加力,蠕动泵可以调控液体流速,以控制流体剪切力。4.观察分析不同流体剪切力(7dynes/cm2和12dynes/cm2)作用不同时间(15min,30min,60min,120min)时,力学信号对成骨细胞形态及增殖能力的影响;并且对应力作用下成骨细胞内骨钙素阳性表达状况进行了初步分析。(1)HE染色倒置相差显微镜观察展示细胞形态(2)MTT法测定细胞增殖活性(3)用Image-pro plus图像分析软件处理,对细胞面积及免疫组化染色结果进行半定量分析结果1.不同流体剪切应力作用对成骨细胞的形态学影响(1)强度为7dynes/cm2的流体剪切应力对成骨细胞形态及细胞面积的影响:与对照组比较,强度为7dynes/cm2的流体剪切力作用15min、30min、60min、120min时细胞形态均有变化,细胞胞突及长轴摆动方向与应力方向趋于一致;本实验细胞面积测定结果显示:与对照组比较,强度为7dynes/cm2的流体剪切力作用30min、60min、120min时细胞面积变化有统计学意义(P<0.05),但作用15min时细胞面积变化无统计学意义(P>0.05)。(2)强度为12dynes/cm2的流体剪切应力对成骨细胞形态及细胞面积的影响:与对照组比较,强度为12dynes/cm2的流体剪切力作用15min、30min、60min时细胞形态均有变化,细胞胞突及长轴摆动方向与应力方向趋于一致;但本实验中观察到受力时间为120min时,细胞形态变化较异常,可观察到细胞核边集,呈现凋亡现象,细胞排列方向性不明显。本实验细胞平均面积测定结果显示:强度为12dynes/cm2的流体剪切力作用60min和120min时细胞面积与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而作用15min和30min与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).(3)不同的流体剪切应力作用(7dynes/cm2和12dynes/cm2)对成骨细胞细胞面积影响的比较分析:本实验细胞平均面积测定结果比较显示:两种不同强度的流体剪切力作用对细胞面积的影响差异有统计学意义(P<0.05).2.不同流体剪切应力作用对成骨细胞增殖活性的影响(1)强度为7dynes/cm2的流体剪切应力对成骨细胞增殖活性的影响:本实验结果显示:与对照组比较,强度为7dynes/cm2的流体剪切力作用15min、30min、60min时细胞的增殖活性差异均有统计学意义(P<0.05);受力组间比较表明:受力60min时细胞的增殖活性最强(P<0.05),而受力15min与30min时细胞增殖活性之间差异无统计学意义.(2)强度为12dynes/cm2的流体剪切应力对成骨细胞增殖活性的影响:本实验结果显示:与对照组(0min)对比,强度为12dynes/cm2的流体剪切力作用15min、30min、60min时细胞的增殖活性差异均有统计学意义(P<0.05);受力组间比较结果表明:受力60min时细胞的增殖活性明显提高(P<0.05),而受力15min与30min时细胞的增殖活性差异无统计学意义.(3)不同的流体剪切应力(7dynes/cm2和12dynes/cm2)作用对成骨细胞增殖活性影响的比较分析:本实验结果显示:两种不同强度(7dynes/cm2和12dynes/cm2)的剪切应力作用对细胞增殖活性的影响差异有统计学意义(P<0.05),其中12dynes/cm2的流体剪切力作用60min时细胞的增殖活性最强。3.强度为12dynes/cm2的流体剪切应力作用不同时间对成骨细胞内BGP阳性表达的影响:本实验结果显示:与对照组(0min)比较,强度为12dynes/cm2的流体剪切力作用60min时细胞内BGP阳性表达差异有统计学意义(P<0.05),具有明显促进细胞内BGP表达增加的作用;而作用15min和30min时细胞内BGP阳性表达差异均无统计学意义;受力组间比较显示:受力60min时细胞内BGP的阳性表达增高明显,与受力15min、30min相比差异均有统计学意义(P<0.05).结论不同的流体剪切应力(7dynes/cm2和12dynes/cm2)作用下力学信号均能引起成骨细胞内部发生效应性的变化,本研究结果表明了力学信号可引起成骨细胞形态、增殖活性及骨钙素表达等发生效应性改变,其中12dynes/cm2的流体剪切应力作用60min具有较强的促成骨细胞增殖分化的能力。本实验结果将对第二阶段关于流体剪切应力下种植体细胞界面信号转导及其关键功能蛋白的研究起到铺垫和基础作用。
其他文献
随着教育教学改革的不断深入,通过对大纲和教材的不断改进和完善,英语教学已经步入了良性的轨道.信息技术的应用,更使英语教学日趋完善.在科学技术飞速发展的今天,计算机和英语是两大基础学科,也是两大工具学科.可以说,谁掌握了计算机和英语,谁就拥有美好的明天.因此,随着网络技术的发展和普及,多媒体教学已成为学校教育面临信息时代的必然选择,是课堂教学的发展趋势。  一、运用多媒体创设情境,激发学生学习爱好 
教育家叶圣陶老先生曾经指出:“简单地说,教育就是要养成习惯。”同样,在我国古代也早就有了“少年若天性,习惯成自然”的说法。其实一切教育都可归结为养成学生的良好习惯。习惯真正是一种顽强而巨大的力量,它可以主宰人的一生,因此,人从幼年起就应该通过教育培养一种良好的习惯。什么表现是好的学习习惯呢?例如:上课认真听讲,爱举手发言,课后自己独立完成作业,独立思考。大胆质疑,善于合作等等。这些都是好的学习习惯
目的: 探讨成人安氏Ⅲ类骨性错合正畸-正颌联合治疗后,其上下颌软硬组织的变化及其变化的相关性。 方法: 选择成人安氏Ⅲ类骨性错合患者10例,汉族,其中男4例,女6例,所有患
目的:  探索能改善牙科氧化锆陶瓷与树脂粘结剂粘结强度的方法一直是口腔修复领域关注的热点问题之一。掺钕短脉冲光纤激光具有光束质量好,单脉冲能量高,脉宽可调,能量转换效
新年的愿望总是美好的,伴随着马年的到来,各种祝福迎面扑来,“马上有钱”,“马上红”,“马上有房”……哪一个祝福最能吸引你的眼球,深入你的心呢?对于我来说,我想“马上有成绩”。  这是一个永恒的话题,这是一个不变的理想,这也是一个远大的目标:如何构建有效课堂。拜读完校领导们精心编写的假期学习材料,我又一次体会到了这一点;同时,我也找到了答案:那就是解放我们,解放教师的思想,把课堂还给学生;唯有如此,
背景:糖尿病是以高血糖为特征的代谢紊乱性全身性疾病,2型糖尿病是老年人糖尿病的主要类型。糖尿病患者伴有微血管病变、免疫力下降、唾液性质改变,已有研究证实糖尿病与牙周病
随着教育改革的不断深入,现代教育技术中的多媒体教学和网络教学已成为当今教学领域——特别是物理教学中的热门话题。在新的形势下,新的课程下,传统的教学观念、教学方法和手段已经不再适应。为了使课堂更有效、更高效,所以在初中物理教学中运用现代教育技术是越来越广泛,其优势也凸显出来。  一、运用多媒体教学营造轻松愉快的学习气氛,提高课堂教学效率  兴趣是最好的老师,没有兴趣的学习,无异于一种痛苦;没有兴趣的
摘要:在大学英语教学改革的新形势下,传统的教学模式及教师角色发生了重大转变。笔者认为大学英语教学的教师角色主要定位为:教学内容的整合者;积极情感的传递者;大学英语课堂的控制者;学生主动学习的促进者;规范语言的示范者;课堂活动的设计者、组织者、参与者、合作者、评价者;研究者。  关键词:大学英语;教师角色;课堂教学  中国分类号:G635.1  所谓“教师角色”是指处在教育系统中的教师所表现出来的由