桑叶多糖提取与纯化工艺的研究

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本研究从桑叶中提取桑叶总多糖,并对其进行分离、纯化。资料报道的桑叶多糖的提取多采用的是热水浸提。桑叶多糖属于细胞壁多糖,在热水中难以浸提出来,并且热水会溶解部分活性成分,因此本试验采取的方案是:利用超声波强化热水浸提,这样可以使桑叶中细胞壁及胞内的部分多糖尽可能的释放出来并能将多糖与其它物质分离,而且可以节能,工作效率高。将浸提所得到的粗总多糖除蛋白后直接用大孔吸附树脂进行分离,用真空冷冻干燥或热风干燥纯化。 本研究以桑叶为原料,研究了桑叶多糖的提取工艺条件及纯化方法。 1.以葡萄糖为标准品,利用可见分光光度法,得出桑叶多糖提取的标准工作曲线,标准曲线的回归方程为C=0.0856x+0.0007,其相关系数R2=0.998。 2.在提取桑叶多糖的工艺过程中,对桑叶分别进行了热水浸提,超声波强化热水浸提,回流提取,通过正交试验确定最佳浸提工艺。结果表明:热水浸提,调节溶液pH为9,加水体积与原料质量为1:20,提取温度为100℃,时间3h;提取效果最好,多糖得率可高达3.35%。超声波强化提取,提取温度50℃,料液比1:20,pH值9,时间20min(分两次提取),超声功率175w,提取效果最好,多糖最大得率可达3.23%。回流提取,提取温度100℃,料液比1:20,pH值9,时间3h,提取效果最好,多糖得率可达3.41%。综合考虑到节能效率等因素,采用超声波强化提取法为最好的提取方法。 3.在纯化桑叶多糖的工艺过程中,采用离子交换树脂进行纯化分离,通过考察选取树脂AB-8,X-5,D101,NKA-Ⅱ,LSA-10等几种树脂进行动态吸附。测上清液的吸光值。参数设置:摇床水浴温度30℃。通过测定流出液的吸光值。选出吸附和解吸性能最佳的树脂为AB8型大孔吸附树脂,最佳工艺条件为上柱流速为1Bv/h,洗脱流速0.6Bv/h。洗脱液:0.1mol/LNaOH溶液。上柱条件,体积浓度为60%的多糖液。 4.糖尿病是一种内分泌代谢性病,因病程长又无特效药,已经成为威胁人类健康的主要疾病之一。降血糖活性桑叶多糖的研究为糖尿病的防治提供了一种新颖、安全、可靠的途径。目前关于桑叶粗多糖防止糖尿病活性成分的探讨及防治机理还处于起步阶段。 本文从桑叶中提取出粗多糖,灌胃四氧嘧啶型糖尿病小鼠,发现桑叶粗多糖能显著缓解糖尿病小鼠多饮、多食、消瘦症状;无论是各周血糖水平的变化,还是单次给药试验、糖耐量试验,桑叶粗多糖都具有明显的降血糖作用。
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