【摘 要】
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人和小鼠的CD300家族中的一些成员已经被认为是磷脂类分子的新受体,但还缺乏进一步的对照研究。我们主要以小鼠CD300家族中一对成对受体CLM1与CLM5作为对照研究对象,用带有标签
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人和小鼠的CD300家族中的一些成员已经被认为是磷脂类分子的新受体,但还缺乏进一步的对照研究。我们主要以小鼠CD300家族中一对成对受体CLM1与CLM5作为对照研究对象,用带有标签的受体胞外段蛋白封闭或结合作为主要研究方法,检测了CLM1/5对磷脂分子的结合和可能的功能。CLM1/5分子均可以结合在凋亡细胞表面并与AnnexinV共定位,也在正常细胞胞内有结合信号。我们进一步使用了包括斑点杂交,脂类包被ELISA,脂质体的多种方法重复证明,CLM1/5在磷脂类中主要结合磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰肌醇-3-磷酸(Ptdlns(3)P),而并非磷脂酰胆碱(PC)与磷脂酰乙醇胺(PE),并且多种方法都提示,CLM1与Ptdlns(3)P结合能力更强。当使用CLM1/5蛋白结合凋亡细胞之后,巨噬细胞对凋亡细胞的清除能力都提高了,提示CLM1/5在巨噬细胞清除凋亡细胞的过程中起抑制作用。并且CLM5分子的抑制作用可以被PI3K的抑制剂所部分抑制,而CLM1则没有这种情况。凋亡细胞的吞噬对于巨噬细胞响应LPS刺激的IL-6分泌有抑制作用,而CLM1蛋白对凋亡细胞的封闭可以在短时间的mRNA水平去除这种作用,相对的,CLM5则不具有这种作用。总之,CLM5在抑制巨噬细胞吞噬凋亡细胞过程中与Ptdlns(3)P的结合有关,而CLM1在凋亡细胞抑制巨噬细胞分泌IL-6中起到了一定作用。
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