皮肤表面表皮葡萄球菌的MLST分型研究

来源 :中国人民公安大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Butterfly1982_2_2
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微生物是世界上存在种类和数量最多的生物,其中人体内部和体表活跃的微生物也数以万计,人体皮肤表面分布的细菌的数量和多样性更是超过以前人们的估计,同时很容易在触摸物体的过程中转移到物体表面遗留下来,所以微生物检材也可能成为了一种新的生物物证,用以进行个体识别或溯源。截至目前国内外还没有一套成熟的法医微生物检验方法。本研究选用多位点序列分型技术(MLST),以人体皮肤表面大量存在的表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermis)为研究对象,首先采集包括皮肤病患者(细菌感染引起)、健康人体手指表面擦拭物及其手机擦拭物共计101份,然后进行表皮葡萄球菌的分离与鉴定,并提取菌株的DNA。再次从备选的10对表皮葡萄球菌MLST分型的管家基因中筛选出7对管家基因(arc C、aro E、gtr E、mut S、pyr R、tpi A、yqi L)进行PCR扩增测序,测序结果与标准序列比对后上传至MLST网站数据库,获得相应的由7对管家基因组成的等位基因谱。最后将等位基因谱提交网站确认该菌株的序列型(STs)。初步构建了利用多位点序列分型技术对人体皮肤表面分离获得的表皮葡萄球菌进行MLST分型的方法。以此来探索不同个体之间表皮葡萄球菌分型是否相同,表皮葡萄球菌是否可以作为一个法医微生物个体识别标签。实验结果显示,表皮葡萄球菌在人体皮肤表面广泛存在,实验从101份样品中共获得53个表皮葡萄球菌的ST型,其中发现10个未报道的新ST型和1个新的等位基因型。同时实验结果也显示不同个体其表皮葡萄球菌的MLST分型不一致,同一个体其表皮葡萄球菌的MLST分型表现较一致。证明该方法可以对不同人体表面的表皮葡萄球菌分子分型进行有效的区分,初步显示表皮葡萄球菌有可能成为一个用于法医个体识别的微生物标签。另外实验还发现多位点序列分型技术是一种有效的微生物分子分型鉴别方法,具有区分效力高、实验方法可标准化,实验结果数字化,适合大规模人群调查和不同实验室间的数据比对,适合建立样本数据库,非常适用于法庭科学应用实际需求。由于时间有限,样本量有限,后期还需要针对该方法的个体特异性、地理特异性、时空稳定性、与物品之间的转移规律做进一步深入系统的研究。
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